МЕТАБОЛИЗМ УГЛЕВОДОВ (Продолжение) 1
Спиртовое брожение осуществляется так называемыми дрожжеподобными организмами, а также некоторыми плесневыми грибками. Суммарную реакцию спиртового брожения можно изобразить следующим образом: Спиртовое брожение С 6 Н 12 O 6 –> 2C 2 H 5 OH + 2СO 2 глюкоза этанол 2
Механизм реакции спиртового брожения чрезвычайно близок к гликолизу. Расхождение начинается лишь после этапа образования пирувата. При гликолизе пируват при участии фермента ЛДГ и кофермента НАДН восстанавливается в лактат. При спиртовом брожении этот конечный этап заменен двумя другими ферментативными реакциями – пируватдекарбоксилазной и алкогольдегидрогеназной. 3
Гликолиз: пируват Молочная кислота (лактат) лактатдегидрогеназа НАДН + Н + НАД + Спиртовое брожение: 4
Таким образом, конечными продуктами спиртового брожения являются этанол и СО 2, а не молочная кислота, как при гликолизе. Существуют и другие виды брожения, конечными продуктами которых могут являться пропионовая, масляная и янтарная кислоты, а также другие соединения. 5
Цикл трикарбоновых кислот = цикл Кребса = цикл лимонной кислоты = цитратный цикл 6 Цикл трикарбоновых кислот впервые был открыт английским биохимиком Г. Кребсом За это выдающееся открытие Г. Кребс получил Нобелевскую премию в 1953 г. (совместно с Ф.Липманом). Цикл трикарбоновых кислот часто называют его именем – цикл Кребса
7 цикл Кребса – общий конечный путь окисления ацетильных групп (в виде ацетил-КоА), в которые превращается в процессе катаболизма большая часть органических молекул, играющих роль «клеточного топлива»: углеводов, жирных кислот и аминокислот.
8 Образовавшийся в результате окислительного декарбоксилирования пирувата в митохондриях ацетил-КоА вступает в цикл Кребса. Данный цикл происходит в матриксе митохондрий и состоит из восьми последовательных реакций
9 Начинается цикл с присоединения ацетил-КоА к оксалоацетату и образования лимонной кислоты (цитрата). Затем лимонная кислота (шестиуглеродное соединение) путем ряда дегидрирований (отнятие водорода) и двух декарбоксилирований (отщепление СО 2 ) теряет два углеродных атома и снова в цикле Кребса превращается в оксалоацетат (четырехуглеродное соединение), т.е. в результате полного оборота цикла одна молекула ацетил-КоА сгорает до СО 2 и Н 2.
10 Первая реакция катализируется ферментом цитрат- синтазой, при этом ацетильная группа ацетил- КоА конденсируется с оксалоацетатом, в результате чего образуется лимонная кислота:
11 В результате второй реакции образовавшаяся лимонная кислота подвергается дегидратированию с образованием цис- аконитовой кислоты, которая, присоединяя молекулу воды, переходит в изолимонную кислоту (изоцитрат). Фермент – аконитатгидратаза (аконитаза).
12 Третья реакция лимитирует скорость цикла Кребса. Изолимонная кислота дегидрируется в присутствии НАД-зависимой изоцитратдегидрогеназы
13 Четвертая реакция – окислительное декарбоксили-рование α-кетоглутаровой кислоты с образованием высокоэнергетического соединения сукцинил-КоА.
14 Пятая реакция – сукцинил-КоА при участии ГТФ и неорганического фосфата превращается в янтарную кислоту (сукцинат). Одновременно происходит образование высокоэрги-ческой фосфатной связи ГТФ за счет высокоэргической тиоэфирной связи сукцинил-КоА:
15 Шестая реакция – сукцинат дегидрируется в фумаровую кислоту. Окисление сукцината катализируется сукцинатдегидрогеназой, в молекуле которой с белком прочно связан кофермент ФАД.
16 Седьмая реакция осуществляется под влиянием фермента фумаратгидратазы (фумаразы). Образовавшаяся при этом фумаровая кислота гидратируется, продуктом реакции является яблочная кислота (малат).
17 Восьмая реакция – под влиянием митохондриальной НАД-зависимой малатдегидрогеназы происходит окисление L-малата в оксалоацетат:
18 За один оборот цикла, состоящего из восьми ферментативных реакций, происходит полное окисление («сгорание») одной молекулы ацетил-КоА. Для непрерывной работы цикла необходимо постоянное поступление в систему ацетил-КоА, а коферменты (НАД+ и ФАД), перешедшие в восстановленное состояние, должны снова и снова окисляться. Это окисление осуществляется в системе переносчиков электронов в дыхательной цепи (в цепи дыхательных ферментов), локализованной в мембране митохондрий
19 при окислении одной молекулы ацетил-КоА в цикле Кребса и системе окислительного фосфорилиро-вания может образоваться 12 молекул АТФ при расщеплении в тканях одной молекулы глюкозы по уравнению С 6 Н 12 О 6 + 6О 2 —>6СО 2 + 6Н 2 О синтезируется 38 молекул АТФ. Несомненно, что в энергетическом отношении полное расщепление глюкозы является более эффективным процессом, чем анаэробный гликолиз.
20
21
22 Цикл трикарбоновых кислот (цикл Кребса).
23
24
25
26 Общий путь катаболизма (ОПК) выполняет как энергетическую, так и анаболическую функцию (рис. 7.9). Анаболическая функция ОПК проявляется в том, что ряд промежуточных продуктов используется для синтеза необходимых организму веществ.
27 Так пируват, α-кетоглутарат и оксалоацетат являются кетокислотами, которые путем трансаминирования могут превращаться в аланин, глутаминовую и аспарагиновую кислоты соответственно. Сукцинил-КоА используется для синтеза гема, а пируват и оксалоацетат могут включаться в процесс синтеза глюкозы.
28 Выведение хотя бы одного метаболита цикла нарушает его работу, так как уменьшает регенерацию оксалоацетата. Для компенсации убыли метаболитов цикла в митохондриях происходит реакция карбоксилирования пирувата с образованием оксалоацетата. Пируват включается в цитратный цикл двумя путями : окислительным декарбоксилированием с образованием ацетил-КоА и карбоксилированием с образованием оксалоацетата. Последнюю реакцию катализирует пируваткарбоксилаза
Пентозофосфатный путь 29
30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
Глюконеогенез Глюконеогенез – синтез глюкозы из неуглеводных продуктов (это молочная и пировиноградная кислоты, так называемые гликогенные аминокислоты, глицерол и ряд других соединений). Предшественники глюкозы в глюконеогенезе: пируват или любое соединение, превращающееся в процессе катаболизма в пируват или один из промежуточных продуктов цикла трикарбоновых кислот. У позвоночных наиболее интенсивно глюконеогенез протекает в клетках печени и почек (в корковом веществе). 40
Образование фосфоенолпирувата из пирувата. Синтез фосфоенолпирувата осуществляется в несколько этапов Первоначально пируват под влиянием пируваткарбоксилазы и при участии СО 2 и АТФ карбоксилируется с образованием оксалоацетата: 41
Затем оксалоацетат в результате декарбоксилирования и фосфорилирования под влиянием фермента фосфоенолпируваткарбоксилазы превращается в фосфоенолпируват. Донором фосфатного остатка в реакции служит гуанозинтрифосфат (ГТФ): 42
Первый этап синтеза протекает в митохондриях. 43
Реакция протекает при участии митохондриальной НАД-зависимой малатдегидрогеназы. В митохондриях отношение НАДН/НАД + относительно велико, в связи с чем внутримитохондриальный оксалоацетат легко восстанавливается в малат, который легко выходит из митохондрии через митохондриальную мембрану. 44
В цитозоле отношение НАДН/НАД + очень мало, и малат вновь окисляется при участии цитоплазматической НАД-зависимой малатдегидрогеназы: Дальнейшее превращение оксалоацетата в фосфоенолпируват происходит в цитозоле клетки. 45
Превращение фруктозо-1,6-бисфосфата во фруктозо-6-фосфат. Фосфоенолпируват, образовавшийся из пирувата, в результате ряда обратимых реакций гликолиза превращается во фруктозо-1,6-бисфосфат. Далее следует фосфофруктокиназная реакция, которая необратима. Глюконеогенез идет в обход этой эндергонической реакции. 46
+ Н 2 О Превращение фруктозо-1,6-бисфосфата во фруктозо-6-фосфат катализируется специфической фосфатазой: Фруктозобисфосфатаза фруктозо- 6-фосфат фруктозо- 1,6-бисфосфат + Pi. 47
Образование глюкозы из глюкозо-6-фосфата В последующей обратимой стадии биосинтеза глюкозы фруктозо-6-фосфат превращается в глюко зо-6-фосфат. Последний может дефосфорилироваться (т.е. реакция идет в обход гексокиназной реакции) под влиянием фермента глюкозо-6-фосфатазы : глюкозо-6-фосфатаза 48
Образование фосфоенолпирувата из пирувата. 1 - пируваткарбоксилаза; 2 - малатдегидрогеназа (митохондриальная); 3 - малатдегидрогеназа (цитоплазматическая); 4- фосфоенолпируват-карбоксикина 49
50 Клетки, недостаточно снабжаемые кислородом, могут частично или полностью существовать за счет энергии гликолиза. Большинство животных и растительных клеток в норме находится в аэробных условиях и свое органическое «топливо» окисляет полностью до СО 2 и Н 2 О. Аэробный метаболизм пирувата
51 В этих условиях пируват, образовавшийся при расщеплении глюкозы, не восстанавливается до лактата, а постепенно окисляется до СО 2 и Н 2 О в аэробной стадии катаболизма, при этом первоначально происходит окислительное декарбоксилирование пирувата с образованием ацетил-КоА.
52 Окислительное декарбоксилирование пировиноградной кислоты Окисление пирувата до ацетил-КоА происходит при участии ряда ферментов и коферментов, объединенных структурно в мультиферментную систему, получившую название «пируватдегидрогеназный комплекс».
53 На I стадии этого процесса пируват теряет свою карбоксильную группу в результате взаимодействия с тиаминпирофосфатом (ТПФ) в составе активного центра фермента пируватдегидрогеназы (E1). На II стадии оксиэтильная группа комплекса E1–ТПФ–СНОН–СН3 окисляется с образованием ацетильной группы, которая одновременно переносится на амид липоевой кислоты (кофермент), связанной с ферментом дигидролипоилацетил-трансферазой (Е2).
54 Этот фермент катализирует III стадию – перенос ацетильной группы на коэнзим КоА (HS-KoA) с образованием конечного продукта ацетил-КоА, который является высокоэнергетическим (макроэргическим) соединением. На IV стадии регенерируется окисленная форма липоамида из восстановленного комплекса дигидролипоамид – Е2.
55 При участии фермента дигидролипоил- дегидрогеназы (Е3) осуществляется перенос атомов водорода от восстановленных сульфгидрильных групп дигидролипоамида на ФАД, который выполняет роль простетической группы данного фермента и прочно с ним связан. На V стадии восстановленный ФАДН 2 дигидро-липоилдегидрогеназы передает водород на кофермент НАД с образованием НАДН + Н +.
56 Процесс окислительного декарбоксилирования пирувата происходит в матриксе митохондрий. В нем в составе сложного мультиферментного комплекса принимают участие: 3 фермента пируватдегидрогеназа ; дигидролипоилацетилтрансфераза ; дигидролипоилдегидрогеназа.
57 5 коферментов: ТПФ; амид липоевой кислоты; коэнзим А; ФАД; НАД.
58 Суммарную реакцию, катализируемую пируватдегидрогеназным комплексом, можно представить следующим образом: Образовавшийся в процессе окислительного декарбоксилирования ацетил-КоА подвергается дальнейшему окислению с образованием СО 2 и Н 2 О. Полное окисление ацетил-КоА происходит в цикле трикарбоновых кислот (цикл Кребса).
59 Е1 - пируватдегидрогеназа; Е2-дигидролипоилацетилтрансфсраза; Е3- дигидролипоилдегидрогеназа; Механизм действия пируватдегидрогеназного комплекса цифры в кружках обозначают стадии процесса.
