Две цепи ДНК закручены в спирать вокруг общей оси Цепи комплементарны и антипаралельны Азотистые основания находятся внутри молекулы ДНК, снаружи сахаро -фосфатный скелет Диаметр спирали – 2 нм Один виток спирали - 10 п.н. = 3,4 нм Расстояние между нуклеотидами – 0,34 нм
Генетический код — это система записи генетической информации о последовательности расположения аминокислот в белках в виде последовательности нуклеотидов в ДНК или РНК. Свойства генетического кода: 1. Код триплетен. Одна аминокислота кодируется тремя нуклеотидами. 2. Код универсален. Все живые организмы (от бактерии до человека) используют единый генетический код. 3. Код вырожден. Одна аминокислота кодируется более чем одним триплетом. 4. Код однозначен. Каждый триплет соответствует только одной аминокислоте. 5. Код не перекрывается. Один нуклеотид не может входить в состав нескольких кодонов в цепи мРНК. Последовательность нуклеотидов в молекуле ДНК определяет её специфичность, а также специфичность белков организма, которые кодируются этой последовательностью. Эти последовательности индивидуальны и для каждого вида организмов, и для отдельных особей вида.
Один шаг это полный виток спирали ДНК–поворот на 360o Один шаг составляют 10 пар нуклеотидов Длина одного шага – 3,4 нм Расстояние между двумя нуклеотидами – 0,34 нм Молекулярная масса одного нуклеотида – 345 г/моль Молекулярная масса одной аминокислоты – 120 г/мол В молекуле ДНК: А+Г=Т+Ц (Правило Чаргаффа : ∑(А) = ∑(Т), ∑(Г) = ∑(Ц), ∑(А+Г) =∑(Т+Ц)
Комплементарность нуклеотидов: А=Т; Г=Ц Цепи ДНК удерживаются водородными связями, которые образуются между комплементарными азотистыми основаниями: аденин с тимином соединяются 2 водородными связями, а гуанин с цитозином тремя. Вычисление молекулярной массы белка: Мmin =( а:в ) *100% где Мmin – минимальная молекулярная масса белка, а – атомная или молекулярная масса компонента, в – процентное содержание компонента.
Определение последовательности нуклеотидов ДНК, иРНК, и антикодонов тРНК. Определение последовательности аминокислот в молекуле белка по таблице генетического кода. Влияние мутации гена на последовательность аминокислот в молекуле белка Определение длины и массы ДНК, иРНК Определение массы белка Определение количества нуклеотидов, их процентное соотношение в ДНК, иРНК Структура и функции гена* Рестрикционные карты*
Задача: ДНК фага имеет молекулярную массу 10 6. Сколько белков может быть в ней закодировано, если принять, что типичный белок состоит из 50 аминокислот? Определите, что имеет большую молекулярную массу – ген или белок. Решение: Определяем молекулярную массу одного белка, зная, что средняя молекулярная масса аминокислоты 120. 50* 120=6000 2. Определяем молекулярную массу одного гена. По условию задачи типичный белок состоит из 50 аминокислот, значит, один ген состоит из 50 триплетов ( соответственно из 150 нуклеотидов). Известно, что средняя молекулярная масса нуклеотида – 345 150*345=51750 3. Определяем число белков, закодированных в ДНК фага. 10 6 = 1 000 000 1 000 000 : 51750 = 19 Таким образом молекулярная масса гена больше молекулярной массы белка.
Задача: В составе участка одной цепи ДНК обнаружено 720 нуклеотидов, 120 из которых входят в состав интронов. Определите длину первоначальной пре- иРНК, длину мРНК и число аминокислот, входящих в состав синтезированного полипептида. Решение: 1. Определяем количество нуклеотидов в составе иРНК, зная, что оно ровно числу экзонов ДНК. 720-120=600 2. Определяем длину пре- иРНК и иРНК, зная что длина одного нуклеотида составляет 0,34 нм. длина пре- иРНК : 0,34 * 720 нуклеотидов= 244,8 нм длина иРНК : 0,34 * 600 нуклеотидов= 204 нм 3. Определяем число аминокислот в полипептиде, зная, что одна аминокислота кодируется тремя нуклеотидами. 600:3=200 аминокислот
Задача: Молекулярная масса фрагмента ДНК составлет90 000. Из общего числа нуклеотидов этого фрагмента на долю тиминовых приходится 85. Определите количество гуаниновых, цитозиновых и адениновых нуклеотидов в данном фрагменте ДНК. Какова длина этого фрагмента ДНК? Решение: 1. Определяем общее число нуклеотидов, входящих в две цепи ДНК, зная что средняя молекулярная масса одного нуклеотида равна 345. 90 000: 345= 260 нуклеотидов 2. Применение правила Чаргаффа. В фрагменте 85 тиминовых, следовательно 85 адениновых нуклеотидов. Находим количество цитозиновых и гуаниновых. 260 - (85+85)=90 90:2=45 (Г или Ц). 3. Определяем длину фрагмента ДНК, зная, что всего он содержит 260 нуклеотидов, по 130 в каждой цепи. Длина ДНК = 0,34 нм * 130 = 44,2 нм.
С 2 хцепочечная ДНК T G A С А U мРНК G C A Антикодоны тРНК Trp Аминокислоты, составляющие белок Задача: Используя таблицу генетического кода, заполните приведенную нижу таблицу. Отметьте 5 ` - и 3` - концы нуклеиновых кислот, а также N– и C– концы полипептида. Транскрипция и трансляция проходят в направлении слева направо.
Решение: С G T A C C A C T G C A 2 хцепочечная ДНК G C A T G G T G A C G T G С А U G G U G A C G U мРНК C G U A C C A C U G C A Антикодоны тРНК Ala Trp – Arg Аминокислоты, составляющие белок 5 ` 3` N C
z Электрофорез - метод исследования биологических макромолекул.
z
Процедура электрофореза
z Рестрикционный анализ Позволяет идентифицировать на ДНК биологически важные участки. Поскольку рестрикционная карта отражает расположение определенной последовательности нуклеотидов в данном участке, сравнение таких карт для двух или более родственных генов позволяет оценить гомологию между ними. Анализируя рестрикционные карты, можно сравнивать определенные участки ДНК разных видов животных без определения их нуклеотидной последовательности. А также позволяет увидеть крупные генетические изменения, такие как делеции или инсерции. При этом происходит уменьшение или увеличение рестрикционных фрагментов, а также исчезновение или возникновение сайтов рестрикции.
Задача: Линейный фрагмент ДНК обработали рестриктазой EcoRI, рестриктазой BamHI и их смесью. Продукты реакции разделили в агарозном геле и окрасили бромистым этидием. Результаты электрофореза представлены на рисунке. Цифры указывают приблизительные размеры фрагментов в п.н. Постройте рестрикционную карту фрагмента.
Решение: В Е Е В 400 350 200 650 150 1750
