Орындаған : Есенбай Е.Н. Қабылдаған : Каракулова А.Ш. Топ : ФҚО-02-24 Кафедра Фармацевтическая и токсиголочиская химия
Сердечные гликозиды - это группа О-гликозидов, агликоны которых имеют стероидную структуру и отличаются выраженным действием на сердечную мышцу. По химической структуре сердечные гликозиды представляют собой эфиры, в молекулах которых гликозидной связью связаны между собой агликон и остатки моно-, ди-, три-, или тетрасахарида.Агликоны (генины) сердечных гликозидов содержат 23 или 24 углеродных атома и различаются между собой степенью окисленности. Агликоны имеют стероидную структуру, т.е. являются производными циклопентанпергидрофенантрена (ЦППФ). Это ненасыщенные стероидные лактоны.По химическому строению агликоны состоят из цикла ЦППФ (кольца А,В, С, D) и лактонного цикла, присоединенного в положении 17, который обычно занимает /?- конфигурацию. В зависимости от структуры лактонного цикла сердечные гликозиды можно разделить на две группы: карденолиды с пятичленным лактонным циклом; буфадиенолиды с шестичленным лактонным циклом.
Сердечные гликозиды могут накапливаться в разных жизненных формах – кустарниках, лианах, травянистых растений (известно около 45 ботанических родов, из них 20 произрастают во флоре СНГ). Они относятся к таким семействам, как норичниковые (наперстянка), кутровые (олеандр, строфант, кендырь), лилейные (ландыш), лютиковые (адонис, морозник), капустные (желтушник) и др.
Карденолиды (сагdia (греч.) - сердце) - СГ, содержащие у С17 пятичленное лактонное кольцо (енолид). Эта основная, наиболее важная группа СГ. В настоящее время известно более 380 соединений этой группы. Радикал -СНз или -СОН; аХ ь Х2, Х3-Н или ОН. В отличие от большинства других стероидов кольца С и D в карденолидах и буфаденолидах имеют г/ис-сочление, а кольца А и В могут иметь как цис-, так и транс-сочлент. Кольца В и С всегда имеют транс- сочление.
Агликоны карденолидов отличаются друг от друга радикалами R, Хь Х2,Х3. В зависимости от углеводной части различают первичные (естественные) гликозиды и вторичные, образованные из первичных и содержащие на 1или 2 молекулы сахара меньше, чем первичные. В наперстянке пурпурной и шерстистой содержатся первичные гликозиды. При гидролитическом расщеплении, а также при хранении и высушивании сырья под действием энзимов первичные гликозиды разрушаются с образованием вторичных гликозидов и других продуктов гидролиза.
Химические свойства и методы анализа. Идентифицируют сердечные гликозиды по цветным реакциям на три фрагмента: сахарный компонент, стероидный цикл, ненасыщенное лактонное кольцо. Обнаружение сахарного компонента Сахара, входящие в состав сердечных гликозидов, дают все цветные реакции, свойственные углеводам: восстанавливают реактив Фелинга, аммиачный раствор нитрата серебра (после гидролиза), образуют окрашенные соединения с ксантгидролом, и диметиламинобензальдегидом. Специфическими сахарами сердечных гликозидов являются 2,6- дезоксисахара, для обнаружения которых применяют реакцию Келлера-Киллиани. Гликозид предварительно растворяют в ледяной уксусной кислоте, содержащей 0,05% -ный хлорид железа (III). Раствор осторожно вливают в пробирку с концентрированной серной кислотой и наблюдают окраску верхнего слоя, подтверждающую наличие в молекуле сахара - дигитоксозы (сине-зеленый цвет) и наличие агликона - дигитоксигенина по окраске на границе двух слоев (лилово-красный или бурый).
Белый или почти белый порошок либо бесцветные кристаллы. Практически нерастворим в воде, легко растворим в смеси из равных объемов метанола и метиленхлорида, мало растворим в 96 % спирте.Удельное оптическое вращение от +13,9 до +15,9(2% раствор в хлоро-форме). ДИГИТОКСИН - D ig i to x in um C 41 H 64 O 13 Белый или почти белый порошок либо бесцветные кристаллы. Практически нерастворим в воде, легко растворим в смеси из равных объемов метанола и метиленхлорида, мало растворим в 96 % спирте.Удельное вращение от + 16 до + 19(2,5 % раствор в хлороформе).
Удельное вращение. От +13,9 до +15,9 в пересчёте на сухое и свободное от остаточных органических растворителей вещество (2 % раствор субстанции в смеси метанол—метиленхлорид 1:1). (ОФС «Оптическое вращение») Прозрачность раствора. Раствор субстанции 0,5 % в смеси метанол—метиленхлорид (1:1) должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей». Цветность раствора. Раствор субстанции 0,5 % в смеси метанол—метиленхлорид (1:1) должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкости»). Раствор для идентификации пиков. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мг фармакопейного стандартного образца дигоксина для идентификации пиков, содержащего примеси A, B, C, E, F, G и K, доводят объём раствора метанолом до метки. Дигоксин
ИДЕНТИФИКАЦИЯ 1. ИК-спектрометрия. Инфракрасный спектр субстанции по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца дигоксина. 2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика дигоксина на хроматограмме раствора стандартного образца дигоксина
УФ-видимый спектр дигитоксина представлен на рисунке 1A. Он показывает, что дигитоксин имет сильный пик поглощения при 225 нм. УФ-видимые профили поглощения лизоцима с дигитоксином и без него представлены на рисунке 1B. УФ-видимая спектроскопия может дать предварительное представление о формировании комплекса между биомакромолекулой и небольшой молекулой или лигандом. В лизоциме, как и в большинстве белков, присутствуют ароматические аминокислоты (триптофан, тирозин и фенилаланин). Эти аминокислоты обладают сильным поглощением при длине волны 280 нм, и любое изменение микроокружения этих аминокислот можно отследить, внимательно изучив изменения в УФ-видимом профиле белка. Как видно из рисунка 1B, наблюдается небольшое снижение поглощения (что более наглядно показано на врезке к рисунку). Это даёт представление о формировании комплекса между лизоцимом и дигитоксином. Дигитоксин
Контроль чистоты Сопутствующие примеси в дигитоксине по ГФ РК определяютТСХ в условиях хроматографирования: сорбент - силикагель; подвижная фаза: метанол-циклогексан-метиленхлорид (15:40:90). Пластинку обрабатывают спиртовым раствором серной кислоты.Высушивают и просматривают в дневном свете. Предельное содержание примесей:гитоксин ( не более 2%), другие гликозиды (не более 1%). Сопутствующие примеси в дигоксине по ГФ РК определяют жидкостной хроматографией в условиях обращенной фазы: колонка длиной 0,15 м и внутренним диаметром 3,9 мм, заполненная силикагелем октадецилсилильным для хроматографии Р с размером частиц 5 мкм; подвижная фаза А: ацетонитрилР — вода Р (10:90, об/об); подвижная фаза В: вода Р — ацетонитрил Р (10:90, об/об);
Физико-химические методы успешно используются в анализе сердечных гликозидов. УФ-спектрофотометрический используется в анализе сырья истандартного вещества при 217-219 нм. Фотометрический метод используется в анализе целанида- с ксантгидроловым реактивом. Флуориметрические методы анализаоснованы на способности сердечных гликозидов флуоресцироватьпод действием сильных кислот и окислительных агентов после кратковременного облучения УФ-светом.Под действием сильных кислот или окислительных агентов происходит дегидратация гликозидов с образованием ангидропроизводных.Так, при действии на гитоксин фосфорной кислоты образуется диангидрогитоксин, который под влиянием УФ-света флуоресцирует. При этом интенсивность флуоресценции пропорциональна концентрации гликозида, что позволяет проводить количественную оценку. Хроматографические методы (ВЭЖХ, ГЖХ, ТСХ) используются для идентификации, определения сопутствующих примесей, количественного определения сердечных гликозидов. Хранение Сердечные гликозиды хранят по списку А в хорошо укупоренных банках оранжевого стекла, в сухом, предохраняющем от света месте.
Применение Сердечные гликозиды замедляют проводимость сердечной мышцы. Это называется их отрицательным дромотропным эффектом. Возникновение дромотропных эффектов обусловлено удлинением рефрактерного периода в атриовентрикулярных и предсердно-желудочковом пучке. Из-за этого эффекта гликозиды применяют в клинике как антиаритмическое средство при лечении наджелудочковых пароксизмальных тахикардий. При мерцательной тахиаритмии СГ способствуют замедлению частоты желудочковых сокращений, удлиняют диастолу, вследствие чего улучшается внутрисердечная и опосредованно системная гемодинимика. Результатом улучшения внутрисердечной гемодиними является уменьшение и исчезновение дефицита пульса.
Муравьева Д.А., Самылина И.А., Яковлев Г.П. Фармакогнозия. Учебник. – 4- е изд., перераб. и доп. – М.: ОАО Издательство «Медицина», 2007. – 656 с.: ил. Самылина И.А., Аносова О.Г. Фармакогнозия: учебное пособие: Атлас в 2 т. – М., 2007. – Т.1. – 192 с.; Т.2. – 384 с. Фармацевтическая химия, том I / Т.А Арыстанова. Алматы, ТОО «Medet Group», 2022. - 554 с.
