Для приготовления мазка необходимо иметь: • Чистое обезжиренное предметное стекло. • Бактериологическую петлю • Культуру, выращенную на плотной питательной среде — агаре, или жидкой среде — бульоне. • Спиртовку. • Набор красок.
1. Обезжиренное предметное стекло и бактериологическую петлю прожигают в пламени горелки. Если мазок готовится с жидкой питательной среды, то каплю культуры наносят петлей на предметное стекло. Если мазок делают из культуры с агара, то петлю с культурой вносят на предметное стекло и добавляют каплю физиологического раствора, в котором суспендируют внесенный материал. Петлю обжигают в пламени горелки. Мазок должен быть тонким, равномерно растертым, округлой формы, размером 1,5-2 см.
2. Высушивание мазка производится при комнатной температуре. 3. Фиксация мазка производится с целью: • Убить микробные клетки. • Обеспечить лучшее прилипание микробов к предметному стеклу. • Облегчить дальнейшее окрашивание. Фиксация мазка в пламени горелки производится 3-кратно, действие пламени должно длиться 2 секунды.
Для более нежной фиксации мазков крови, спирохет и простейших использующих химические фиксаторы: • Метиловый спирт в течение 5-и минут. • Этиловый спирт (96°) в течение 10-и минут. • Смесь Никифорова — в течение 10-15 минут. • Ацетон — в течение 5-и минут. • Пары формалина — в течение нескольких секунд.
4. Окраска препаратов проводится: • Простыми методами (водным фуксином Пфейффера, метиленовой синькой Леффлера ), когда окрашивается вся клетка и используется только один краситель; • Сложными методам, когда определяются клеточные структуры, После экспозиции мазок промывают водой, высушивают фильтровальной бумагой и микроскопируют под иммерсией.
