Метод светлого поля в проходящем свете применяется при исследовании прозрачных препаратов, у которых различные участки структуры по-разному поглощают свет
1. Окуляр 2. Тубус 3. Держатель (ШТАТИВ) 4. Винт грубой фокусировки 5. Винт точной (микрометренной) фокусировки 6. Револьверная головка 7. Объектив 8. Предметный столик
При микроскопии неокрашенных микроорганизмов, отличающихся от окружающей среды только по показателю преломления, изменения интенсивности света (амплитуды) не происходит, а изменяется только фаза прошедших световых волн. Поэтому глаз этих изменений заметить не может и наблюдаемые объекты выглядят малоконтрастными, прозрачными. Для наблюдения таких объектов используют фазово-контрастную микроскопию, основанную на превращении невидимых фазовых изменений, вносимых объектом, в амплитудные, различимые глазом.
Основная особенность темнопольных конденсоров заключается в том, что центральная часть у них затемнена и прямые лучи от осветителя в объектив микроскопа не попадают. Объект освещается косыми боковыми лучами и в объектив микроскопа попадают только лучи, рассеянные частицами, находящимися в препарате.
Принцип действия люминесцентных микроскопов основывается на свойствах флюоресцентного излучения. Микроскопы используются для исследования прозрачных и непрозрачных объектов. Люминесцентное излучение, по-разному отражается различными поверхностями и материалами, что и позволяет успешно применять его для проведения иммунохимических, иммунологических, иммуноморфологических и иммуногенетических исследований.
Обычный просвечивающий электронный микроскоп похож на световой, за тем исключением, что объект облучается не световым потоком, а пучком электронов, генерируемым специальным электронным прожектором. Полученное изображение проецируется на люминесцентный экран с помощью системы линз. Увеличение просвечивающего электронного микроскопа может достигать миллиона, однако, для атомно-силовых микроскопов и это не предел. Именно атомным микроскопам, способным вести исследования на молекулярном и даже атомном уровне, мы обязаны многим последним достижениям в областях генной инженерии, медицины, биологии и других наук.
Стереомикроскопы, как и другие виды оптических микроскопов, позволяют работать как в проходящем, так и в отражённом свете. Большинство стереомикроскопов дает существенно меньшее увеличение, чем современные оптические микроскопы, однако имеет существенно большее фокусное расстояние, что позволяет рассматривать крупные объекты. Кроме того, в отличие от обычных оптических микроскопов, которые дают, как правило, инвертированное изображение, оптическая система стереомикроскопов не "переворачивает" изображение. Это позволяет широко использовать их для препарирования микроскопических объектов вручную или с использованием микроманипуляторов.
ЦАРСТВА ВИРА ПРОКАРИОТЫ ЭУКАРИОТЫ ВИРУСЫ СОБСТВЕННО БАКТЕРИИ ГРИБЫ ПРОСТЕЙШИЕ СПИРОХЕТЫ РИККЕТСИИ ХЛАМИДИИ МИКОПЛАЗМЫ АКТИНОМИЦЕТЫ
ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ К БАКТЕРИОФАГАМ ГЕНЕТИЧЕСКИЕ ТИП ДЫХАНИЯ УЛЬТРАСТРУКТУРНЫЕ АНТИГЕННЫЕ ТАКСОНОМИЧЕСКИЕ ПРИЗНАКИ ХИМИЧЕСКИЕ ПРИЗНАКИ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ ДЛЯ ТАКСОНОМИЧЕСКОЙ КЛАССИФИКАЦИИ МИКРООРГАНИЗМОВ ТИНКТОРИАЛЬНЫЕ КУЛЬТУРАЛЬНЫЕ МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ БИОХИМИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ПИТАНИЯ
ПРИЗНАКИ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ ДЛЯ ТАКСОНОМИЧЕСКОЙ КЛАССИФИКАЦИИ Морфологические: а) величина, форма, наличие спор, капсулы, жгутиков, взаиморасположение; б) особенности ультраструктуры. 2. Тинкториальные – способность окрашиваться. 3. Культуральные свойства – особенности роста на жидких и плотных питательных средах: скорость роста, характер колоний на плотных питательных средах и т.д. 4. Особенности питания - углеродное питание (ауто-, гетеротрофы), азотное питание (аминоауто-, аминогетеротрофы), усвоение питательных веществ прототрофами, ауксотрофами. 5. Тип дыхания – аэробный, анаэробный, факультативно-анаэробный, микроаэрофильный. 6. Биохимические свойства – способность ферментировать углеводы, белки, жиры. 7. Антигенные свойства - родо-, видо-, вариантоспецифичность. 8. Чувствительность к бактериофагам. 9. Химический состав – состав и содержание основных сахаров, аминокислот клеточных стенок, наличие белков, соответствующих данному виду бактерий. 10. Свойства генома – способность к рекомбинации, наличие внехромосомных факторов, величина, объём, молекулярная масса генома, степень гомологии с другими геномами.
МОРФОЛОГИЯ БАКТЕРИЙ ФОРМЫ БАКТЕРИЙ ШАРОВИДНЫЕ стрептококки стафилококки диплококки тетракокки сарцины микрококки
МОРФОЛОГИЯ БАКТЕРИЙ ФОРМЫ БАКТЕРИЙ ПАЛОЧКОВИДНЫЕ стрепто- бактерии корине- бактерии фузо- бактерии дипло- бактерии моно-бактерии клострии (бациллы ) бациллы (стрепто) бациллы (моно)
ИЗВИТЫЕ вибрионы спирохеты спирилы актиномицеты лептоспиры боррелии трепонемы МОРФОЛОГИЯ БАКТЕРИЙ ФОРМЫ БАКТЕРИЙ
КЛАССИФИКАЦИОННЫЕ КАТЕГОРИИ МИКРОРГАНИЗМОВ ВАРИАНТЫ ОТДЕЛ КЛАСС ПОРЯДОК БАКТЕРИОЦИНО ХЕМО - КУЛЬТУРАЛЬНЫЕ СЕМЕЙСТВО РОД ВИД СЕРО - ФАГО - МОРФО -
ОСНОВНЫЕ КЛАССИФИКАЦИОННЫЕ ПОНЯТИЯ КЛОН ВАРИАНТ (ВАР) ПОПУЛЯЦИЯ КУЛЬТУРА ШТАММ ВИД КОЛОНИЯ
ОСНОВНЫЕ КЛАССИФИКАЦИОННЫЕ ПОНЯТИЯ ВИД – эволюционно сложившаяся совокупность особей, имеющая единый генотип, проявляющийся сходными фенотипическими признаками. ВАРИАНТ (ВАР) - особи одного вида, различающиеся по разным признакам ( серовары, хемовары, культивары, морфовары, фаговары ). ПОПУЛЯЦИЯ - совокупность особей одного вида, относительно длительно обитающих на определенной территории. КУЛЬТУРА - совокупность бактерий одного вида (чистая) или нескольких видов (смешанная), выращенная на питательной среде (жидкой или плотной). КОЛОНИЯ – видимое скопление бактерий одного вида на поверхности или в глубине плотной питательной среды. ШТАММ - чистая культура одного вида бактерий, выделенная в определенное время из одного источника. КЛОН - культура клеток, выращенная из одного микроорганизма методом клонирования.
СХЕМА ФОРМИРОВАНИЯ БИНОМИНАЛЬНОГО НАЗВАНИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ Место обитания Морфология колонии Морфология бактерий ВИД Фамилия автора РОД Клинические признаки Географическое место выявления
ПРИМЕРЫ КОНСТРУИРОВАНИЯ БИНОМИНАЛЬНОГО НАЗВАНИЯ БАКТЕРИЙ Вид бактерий Условное обозначение принадлежности к: РОДУ ВИДУ Bacillis anthracis Bacillus (палочка) а nthracis (уголь) Clostridium tetanus Clostridium (веретено) tetanus (судороги) Staphylococcus aureus Staphylococcus (гроздья винограда, шар) а ureus (золотистый цвет колоний) Shigella dysenteriae Shigella (Шига – автор) dysenteriae (расстройство кишечника) Esherichia coli Esherichia (Эшерих – автор) с oli (кишка) Salmonella typhi Salmonella (Сальмон – автор) typhi («туман» – бред)
УЛЬТРАСТРУКТУРА БАКТЕРИЙ
УЛЬТРАСТРУКТУРА МИКРООРГАНИЗМОВ А – прокариотическая клетка: КС – клеточная стенка, П – плазмолемма, Р – рибосомы и ПР – полирибосомы, кольцевидная, замкнутая молекула ДНК (обычно в центре). Б – эукариотическая клетка: КС – клеточная стенка, П – плазмолемма, КГ – комплекс Гольджи, М – митохондрии, В – вакуоли, ЭС – эндоплазматическая сеть, МТ – микротрубочки, Я – ядро.
УЛЬТРАСТРУКТУРА БАКТЕРИАЛЬНОЙ КЛЕТКИ НУКЛЕОИД – ДНК, РНК, белки (отсутствуют мембрана, гистоны, не делится митозом). ЦИТОПЛАЗМА: а) рибосомы – синтез белка, б) плазмиды – генетические функции, в) включения – валютин, гликоген, крахмал, запас питательных веществ. ЦИТОПЛАЗМАТИЧЕСКАЯ МЕМБРАНА – транспорт извне питательных веществ. МЕЗОСОМЫ – производные ЦПМ – участие в делении. КЛЕТОЧНАЯ СТЕНКА – придает бактериям постоянную форму. Основа пептидогликан: грам (-) – однослойный, грам (+) – многослойный. ЖГУТИКИ – аппарат передвижения. ПИЛИ: а) первого типа – общие пили (100-200) адгезивные, б) второго типа - коньюгативные (половые) пили (1-4). КАПСУЛА (макрокапсула, слизистый чехол, микрокапсула): а) не является необходимой частью клетки, б) химическое строение – полисахарид, в) образуется главным образом в организме, г) функция приспособления (защита бактерии, агрессия для организма). СПОРА: а) форма сохранения вида в неблагоприятных условиях, б) не является способом размножения, в) место расположения – центральная, субтерминальная, терминальная
ФУНКЦИЯ КЛЕТОЧНОЙ СТЕНКИ Защитная роль Регуляция роста и деления Сохраняет форму клетки Рецепторы для бактериофагов Взаимосвязь с внешней средой Определяет антигенную структуру Придаёт форму, ригидность и эластичность Клеточная стенка
Угнетает миграцию макрофагов Содержит родо - и видоспецифические гены Противоопухолевое действие Тормозит фагоцитоз макрофагов Индуцирует гиперчувствительность замедленного типа Запуск активации комплемента Пирогенное действие на человека и животных ФУНКЦИЯ ПЕПТИДОГЛИКАНА КЛЕТОЧНОЙ СТЕНКИ Пептидогликан
1 - цитоплазматическая мембрана; 2 - пептидогликан ; 3 - периплазматическое пространство ; 4 - наружная мембрана; 5 - цитоплазма, в центре которой расположена ДНК.
Компоненты клеточной стенки Грамположительные эубактерий Грамотрицательные эубактерий внутр слой пептидогликановый внеш слой нар.клет.мембрана Пептидогликан + + - Тейхоевые кислоты + - - Полисахариды + - + Белки -,+ - + Липиды -,+ - + Липополисахариды - - + Липопротеины - + +
а) лофотрихи, б) монотрихи, в) перитрихи, г) амфитрихи.
Отличительные свойства РИККЕТСИИ АКТИНОМИЦЕТЫ СПОСОБ РАЗМНОЖЕНИЯ ЦИТОПЛАЗМА ОСТАЛЬНЫЕ БАКТЕРИИ СПОРАМИ ОБЛИГАТНЫЙ ВНУТРИКЛЕТОЧНЫЙ ВНУТРИ ТЕЛА НЕКОТОРЫЕ ОТЛИЧИТЕЛЬНЫЕ И ОБЩИЕ СВОЙСТВА ОТДЕЛЬНЫХ ВИДОВ БАКТЕРИЙ ( АКТИНОМИЦЕТ, РИККЕТСИЙ, ХЛАМИДИЙ, МИКОПЛАЗМЫ ) С ОСТАЛЬНЫМИ БАКТЕРИЯМИ Общие свойства с другими бактериями МЕМБРАНА НУКЛЕОИД СПИРОХЕТЫ ХЛАМИДИИ МИКОПЛАЗМЫ ХАРАКТЕР ПАРАЗИТИЗМА РАСПОЛОЖЕНИЕ ЖГУТИКОВ КЛЕТОЧНАЯ СТЕНКА ОТСУТСТВУЕТ БИНАРНЫМ ДЕЛЕНИЕМ ФАКУЛЬТАТИВНЫЙ СНАРУЖИ ТЕЛА ИМЕЮТ
