Выполнена: преподаватель микробиологии Саенко Т.П. САНКТ-ПЕТЕРБУРГСКОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ СРЕДНЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ «МЕДИЦИНСКИЙ КОЛЛЕДЖ № 3» Санкт-Петербург 2019 г.
инфекции, вызываемые бактериями рода Clostridium : газовая гангрена (C. perfringens и другие "гистотоксические" клостридии ) столбняк (C. tetani ) ботулизм (C. botulinum ). 2
3
4 К роду Clostridium – это около 120 видов,относятся Гр +, подвижные палочки (реже неподвижные), величиной 1,5-20,0 мкм, с закругленными, иногда с заостренными концами, часто расположенные в парах или короткими цепочками. Образуют овальные или круглые эндоспоры, придающие клеткам веретенообразную форму (от гр. kloster — веретено ).
5 Наиболее характерные признаки клостридий способность вызывать маслянокислое брожение: анаэробный распад углеводов с образованием масляной кислоты и газов ( СО2,водород, иногда метан). Восстанавливают (редуцируют) сульфиты до сульфидов. Обычно каталазоотрицательные. Большинство видов — строгие анаэробы ;
6 Клостридии вызывают 3 смертельно опасных заболевания: газовую гангрену (C. perfringens и другие "гистотоксические" клостридии ) столбняк (C. tetani ) ботулизм (C. botulinum ). патологии пищеварительного тракта, включая относительно доброкачественные энтероколиты и деструктивные процессы, требующие активного врачевания (C. perfringens, C. difficile ).
7 Возбудитель столбняка. Столбняк - токсико-инфекционное заболевание с нервно-судорожным синдромом. Летальность при посттравматическом столбняке – 45-50 %
8 Токсикоинфекция, вызываемая Clostridium tetani, опосредованное нейротоксическим действием бактериального экзотоксина (тетаноспазмина). Ведущее проявление — судорожный синдром, включающий болезненные сокращения мышц (тетанус) и длитель- ное напряжение мышц (мышечная ригидность).
опистотонус ( тетанический спазм, при котором позвоноч-ник и конечности согну-ты, больной лежит на спине и опирается на затылок и пятки ) risus sardonicus (risus caninus) — подобие оскала, вызванного спазмом мышц головы (сардоническая улыбка).
Возбудитель столбняка практически одновременно открыли Монастырский (1883) и Николайер (1884), в чистой культуре впервые выделен Китазато (1889). Китазато Монастырский
Микроорганизмы встречаются повсеместно, ежегодная смертность от столбняка в мире превышает 100 000 человек. Естественный резервуар и источник инфекции — почва. Входные ворота инфекции — бытовые и произ-водственные травмы, причем наиболее часто поверхностные, когда больной не обращается за медицинской помощью. Заболеваемост ь значительно возрастает во время военных действий у раненых; основная группа риска в мирное время — работники сельского хозяйства (составляют 80-86% заболевших).
Вегетативные клетки. Гр + палочки с закругл-енными концами длиной 4-8 мкм и толщиной 0,3-0,8 мкм, располагаются одиноч-но или цепочками, подвижны (перетрихи), но в старых культурах (30 сут. и более) преоб-ладают неподвижные формы. Облигатные (строгие) анаэробы, отличаются высокой чувствитель-ностью к О2;
Споры круглые, реже овальные, расположены терминаль но, их диаметр в 2-3 раза превышает толщину бакте- рий, вследствие чего споран- гий имеет форму барабанной палочки. Их отличает высокая устойчивость к химическим и физическим воздействиям, в частности, они выживают в течение 8-10 ч в 1% растворе сулемы и 5% растворе фенола, выдерживают кипячение в течение 0,5-1 ч.
СРЕДА КИТТА-ТАРОЦЦИ используют для культивиро-вания и хранения клостридий. Состоит из питательного бульона, 2% глюкозы и кусочков печени или мясного фарша для адсорбции кислорода. После посева среду заливают небольшим слоем вазелинового масла. Выросшие анаэробы вызывают помутнение питательной среды.
в расплавленный и охла-ждённый сахарный агар вносят культуру бактерий и заливают под стекло, помещён-ное на пробковых палочках(или фрагме-нтах спичек) в чашку Петри. Метод наименее надежен из всех, но достаточно прост в применении.
На МПА и желатине : возбудитель растет медленно образует тонкие прозрачные колонии с ровными или шероховатыми краями рост колоний характерный — сначала на поверхности среды появляется сеточка, образованная сливающимися колониями с отростками.
Растет в виде прозрачных или серовато-желтых шероховатых (R) и гладких (S) колоний. На КА – зона гемолиза. При посеве уколом в полужидкий агар через 24-48 ч формирует колонии в виде чечевичек (R-форма) или пушинок с плотным коричневым центром (S-форма ).
Патогенность C. tetani обусловлена способностью образовывать тетаноспаз-мин и тетанолизин : вызывают столбняк у человека и животных. Антигенная структура У Clostridium tetani выявляют О- и Н-Аг. По жгутиковым Аг выделяют 10 серова-ров, все серовары продуцируют идентичные по своим антигенным свойствам тетаноспазмин и тетанолизин.
Тетаноспазмин — поли-пептид действует дис-танционно, т.к. бактерии редко покидают преде-лы раны. Токсин фиксируется на поверхности отрост-ков нервных клеток, проникает в них и попадает в ЦНС.
Механизм действия связан с подавлени-ем высвобождения тормозных нейро-медиаторов Первоначально ток-син действует на пе-риферические нер-вы, вызывая мест-ные тетанические сокращения мышц.
Для получения токсина in vitro бактерии можно выращивать на мясных средах, например бульоне Мартена с пептоном, и др. В отечественной практике наибольшее распространение получила среда из кисло-тного гидролизата казеина, экстракта пшеничных отрубей и дрожжевого экстракта (в среду можно добавлять рыбную муку).
Тетанолизин (тетаногемолизин) C. tetani обладает гемолитическим, кардиото-ксическим и летальным свойствами, в патогенезе заболевания играет менее важную роль; процессы его образования не связаны с синтезом тетаноспазмина.
Естественный иммунитет к столбняку отсутствует. В отношении постинфекцион-ного иммунитета существуют противоречи-вые данные. Иммунопрофилактика. столбнячный ана токсин применяют для активной иммунопрофилактики столбня-ка, при заболевании применяют столбняч-ный анти токсин – гипериммунную чело-веческую антисыворотку (курс — 2 инъек-ции, в тяжелых случаях — 3 инъекции дроб-но).
Это раневая полиинфекция. Основными возбудителями являются: Clostridium perfringens, С. h istolyticum, С. n ovyi, С. s epticum, и др.
Clostridium perfringens — один из основных видов рода По способности образовывать 4 главных токсина ( -, -, -, -), микроорганизмы разделяют на 6 сероваров — А В, С, D, Е и F Основной возбудитель заболеваний человека — C. perfringes типа А, вызывает : - Газовую гангрену людей и животных, - пищевые токсикоинфекции
ТИП B Дизентерия молодняка сельскохозяйственных животных, энтеротоксемия овец и коз ТИП C Некротический энтерит человека, геморрагическая энтеротоксемия овец, коз, поросят и телят ТИП D Инфекционная энтеротоксемия человека, овец, коз, кроликов, телят, «травяная болезнь» лошадей ТИП E Энтеротоксемия телят и ягнят
C. perfringens образует как минимум 12 иденти-фицированных токсинов (ферментов) -Токсин (лецитиназа) проявляет дерма - тонекротизирующее, гемолитическое и летальное (убивает лабораторных жи - вотных при внутривенном введе - нии) продуцируют все типы C.perfringens, но наиболее интенсивно тип А.
-Токсин вызывает некроз тканей и оказывает летальное действие на морских свинок-альбиносов, гемолитического действия не оказывает, активность in vivo реализуется в развитии некротических энтеритов, основные продуценты — типы В и С. - и -токсины оказывают летальное и дерматонекротизирующее действие
Энтеротоксин образуют C.perfrin- gens типов А и С, вызывающие пище- вые токсикоинфекции, вызывает рвоту и диарею, оказывает летальное действие, обусловливает появление эритематозной кожной сыпи у лабораторных животных.
Газовая гангрена развивается при попадании возбудителей или их спор на раневые поверхности. Для поражений характерны: некроз тканей Обильное образование газа с гнилост-ным запахом. Характерная особенность гистологичес-ких препаратов, полученных из очагов поражения — практически полное отсутст-вие фагоцитов в очаге некротических поражений.
Вегетативные клетки — крупные, Гр +, непод-вижные, короткие палоч-ки с обрубленными конца-ми ( один из немногих неподвижных видов). In vivo образуют капсулы ( единственный капсуло-образующий вид среди патогенных клостридий).
Споры крупные, ова- льные, расположены центрально (у С. Perfrin- gens типа А — также суб- терминально), Клетка-спорангий пра- ктически не деформиру- ется. Термоустойчивость спор серотипов В и D - погибают при кипячении в течение 15-30 минут споры типов А и С выживают при кипячении и даже автоклавировании в течение 1-6 ч.
Микроорганизмы широко распространены в окружающей среде, их выделяют из воды, почвы и сточных вод, часто обитают в кишечнике людей и животных; Clostridium perfringes также способны вегетировать в почве, богатой гумусом. Наиболее часто в почве и испражнениях обнаруживают серотип А.
В соответствии с методическими указаниями по лабораторной диагностике предусмотрено: обнаружение и идентификация токсина в содержимом тонкого кишечника в реакции нейтрализации на белых мышах. Параллельно проводится выделение и идентификация возбудителя по тинкториальным, культуральным и токсигенным свойствам, изучение ферментативных свойств не предусмотрено. Используются лабораторные животные.
Клостридии дифференцируют по культуральным признакам. На сахарно-кровяном агаре С. perfringens образует гладкие сероватые с ровными краями и плотным возвышением в центре колонии; С. novyi — шероховатые колонии с признаками гемолиза; С. septicum образует сплошной нежный налет, переплетающиеся нити на фоне гемолиза, С. histolyticum — небольшие блестящие колонии с ровными краями и небольшой зоной гемолиза вокруг,
пищевая интоксикация возбудитель ботулизма Clostridium botulinum ,
Ботулизм - тяжелая пищевая интокси-кация, возникающая в результате отравле-ния токсинами бактерий ботулизма и характеризующаяся тяжелым поражением нервной системы. Нейротоксин блокиру-ет передачу импульсов в нервной систе - ме и у человека развиваются параличи мышц.
Инкубационный период ( 2—12 ч ) развиваются явления общей интоксикации и появляются первые признаки: поражения органов зрения — расстройство аккомодации, двоение в глазах, поражения глазных мышц, расширение зрачков. Вместе с этим затрудняется глотание, появляются афония, головная боль, головокружение, иногда рвота. Летальность высока ( до 60 %).
С. botulinum — описан впервые Э. ван Эрменгемом в 1896 г. во время расследова-ния вспышки ботулизма. Микроорганизм был выделен из ветчины и из органов умерших.
Возбудитель - анаэроб широко распространен в природе, длительное время может находиться в почве в виде спор. Передается алиментарным путем ( при употреблении мясных, рыбных, овощных, грибных консервов, колбасы). Источник инфекции - человек, животные, рыбы, моллюски. Без доступа воздуха клостридии вырабатывают ботулотоксин.
С. botulinum включает серовары ( А, В, Ci, C 2, D, E, F, Q ), различающиеся по антигенной структуре образуемых ими токсинов. Каждый из токсинов может быть нейтрализован только гомологичной сывороткой. Это очень сильный яд, он сильнее яда гремучей змеи в более чем 300000 раз. Токсин не разрушается кишечным соком, а некоторые его типы (токсин типа Е ) даже усиливает свое действие.
Гр + палочки, размерами 4—9 X 0,6—1,0 мкм, перитрихи, образуют субтерминально расположенные споры. «теннисная ракетка». Капсулу не образуют.
Строгий анаэроб. Размножается на глюкозо-кровяном агаре, образуя неправильной формы колонии с отростками или ровными краями, зоной гемолиза вокруг колоний. В столбике агара колонии напоминают комочки ваты или чечевицу. В жидких средах образует-ся равномерная муть, а затем на дно пробирки выпадает компактный осадок.
В почве клостридии ботулизма не только сохраняются длительное время, но и размножаются. Вегетативные формы С. botulinum малоустойчивы в окружающей среде, Споры: выдерживают длительное высушивание, замораживание до —253 °С, кипячение от 1 до 6 ч. В 5 % растворе фенола сохраняют жизнеспособность до 1 сут. Ботулинический токсин при кипячении разрушается в течение 10 мин. Он обычно накапливается в пищевом продукте при размножении в нем С. botulinum.
Для установления источника инфекции исследуются подозреваемые продукты, которые употребляли заболевшие. Исследования ведут параллельно на обнаружение токсина и выделение культуры возбудителя. Для обнаружения токсина используют белых мышей, которым подкожно или внутрибрюшинно вводят вместе с поливалентной антитоксической противоботулиническои сыворот- кой (А, В, С, Е) исследуемый материал,
Другая группа мышей получает материал без сыворотки. В том случае, когда животные второй группы погибают, ставят развернутую реакцию нейтрализации для определения типа токсина. Для получения культуры возбудителя исследуемый материал засевают в жидкие питательные среды. Выделенную культуру идентифицируют, культуральную жидкость испытывают в реакции нейтрализации на наличие в ней ботулинического токсина определенного серотипа.
ЭКЗОТОКСИНЫ - вещества белковой природы, выделяемые во внешнюю среду живыми патогенными бактериями. Оказывают избирательное повреждающее действие на клетки макроорганизма. Экзотоксины высокотоксичны, обладают выраженной специфичностью действия и иммуногенностью. ЭНДОТОКСИНЫ - токсические субстанции, входящие в структуру бактерий (обычно в клеточную стенку) и высвобождающиеся из них после лизиса бактерий. Эндотоксины в отличие от экзотоксинов более устойчивы к повышенной температуре, менее ядовиты и малоспецифичны.
Под редакцией А.С. Лабинской, Н.Н. Костюковой, С.М. Ивановой. Руководство по медицинской микробиологии. Том 3. Москва. БИНОМ. 2015г. Бабичев С., Коротяев А. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология. 5-е издание. 2017 г. В.В. Сбойчаков. Микробиология с основами эпидемиологии и методами микробиологических исследований. СПб. СпецЛит. 2011 г. Н.Д. Ющук, Ю.Я. Венгеров. Лекции по инфекционным болезням. 4-е издание. Том 1. Москва. Издательская группа «ГЭОТАР-Медиа». 2016 г. http://www.monikiweb.ru/sites/default/files/page_content_files/Sapicheva_Sepsis.pdf http://dezr.ru/82-uchebnye-materialy/67-klebsiella-pneumoniae http://docplayer.ru/51706378-Epidemiologiya-sepsisa.html 54
