раздел медицинской микробиологии, изучающий микроорганизмы, содержащиеся в окружающей среде, способные оказывать неблагоприятное воздействие на состояние здоровья человека. Она разрабатывает: микробиологические показатели гигиенического нормирования, методы контроля за эффективностью обеззараживания объектов окружающей среды, выявляет в объектах окружающей среды патогенные, условно-патогенные и санитарно-показательные микроорганизмы. Обнаружение патогенных микроорганизмов позволяет дать оценку эпидемиологической ситуации и принять соответствующие меры по борьбе и профилактике инфекционных заболеваний.
Вода Почва Воздух Объекты окружающей среды в ЛПУ Пищевые продукты Отходы
1. Индикаторы фекального загрязнения- представители микрофлоры кишечника человека и животных. 2. Индикаторы воздушно-капельного загрязнения – комменсалы верхних дыхательных путей. 3. Индикаторы процессов самоочищения - обитатели внешней среды.
Группа микроорганизмов, свидетельствующая о фекальном загрязнении окружающей среды Эта группа объединяет более 100 видов микроорганизмов, обитающих в кишечнике человека, животных и птиц, куда входят представители родов Escherichia, Citrobacter, Enterobacter, Klebsiella, Serratia. Они обладают высокой устойчивостью к неблагоприятным условиям и могут долго сохраняться в воде, почве, на предметах быта. Наиболее интенсивно развиваются при температуре 37°С, но длительно сохраняют жизнеспособность при комнатной температуре.
ОКФБ (общие колиформные бактерии)- это санитарно-бактериологическое и экологическое понятие. Указывают на средней давности фекальное загрязнение Включает представителей семейства Enterobacteriaceae, родов: Escherichia, Citerobacter, Enterobacter, Serracia, Klebsiella, Proteus и др.
Гр(-) короткие палочки, Спор не образуют, Сбраживающие глюкозу и лактозу с образованием кислоты и газа при 37 о С в течение 24-48 часов, Не обладают оксидазной активностью Контроль ОКФБ
ТТКФБ ( термотолерантные колиформные бактерии). Свидетельствуют о свежем фекальном загрязнении. Обладают всеми признаками ОКФБ, но способны ферментировать лактозу до кислоты и газа при 44 о С в течение 24 ч.
Сульфитредуцирующие клостридии – это спорообразующие анаэробные палочки, восстанавливающие сульфит натрия при культивировании на железосульфитном агаре при 44 о С в течение 18 часов. Обнаружение спор в почве, воде открытых водоемах свидетельствует о давнем фекальном загрязнении Обнаружение спор на оборудовании пищеперерабатывающих предприятий или в питьевой воде – недостаточности дезинфекции
Это спорообразующие Гр(+) бациллы, актиномицеты, активно размножающиеся в компостных кучах, навозе при температуре 55-60 о С.
Тип загрязнения Санитарно-показательные микроорганизмы БГКП энтерококки клостридии термофилы Свежее фекальное загрязнение +++ +++ +++ -/+ Давнее фекальное загрязнение - - ++ -/+ О массивности свежего фекального загрязнения судят по количеству БГКП и энтерококков; О давности фекального загрязнения судят по соотношению БГКП, энтерококков и клостридий ; О характере загрязнения судят по соотношению фекальных бактерий и термофилов.
Титром называют минимальный объем воды или почвы, в котором содержится одна жизнеспособная клетка санитарно-показательного микроорганизма Индексом называют количество клеток санитарно-показательных микроорганизмов в 1 л (для воды) или в 1 кг (для почвы).
10 10 бактерий на 1г почвы
Характеристика почвы Коли-титр Перфрингенс-титр Количество термофильных бактерий в 1 г почвы Чистая 1,0 и выше 0,01 и выше 10 2 -10 3 Загрязненная 0,9-0,01 0,009-0,0001 От 10 3 до 10 5 Сильно загрязненная 0,009 и ниже 0,00009 и ниже От 10 5 до 4х10 6
Случаев в год, Россия Случаев в год, США и ЕС Листериоз 30-100 (0,02-0,067/100 000) 0,26-1,8/100 000 Сальмонеллез 36/100 000 35/100 000 E. coli O157:H7 ? 0,6-0,9/100 000 Выживаемость микроорганизма в среде Listeria 2 месяца Salmonella 6-28 месяцев E. coli O157:H7 50-56 дней
Автохтонная флора (водная) – это микроорганизмы, живущие и размножающиеся в воде. Микробное население отражает состав микрофлоры почвы, с которой вода соприкасается: Аэробы : Micrococcus roseus, Sarcina lutea, Bacteroides aqualitis, Pseudomonas fluorescens ; Анаэробы: Bacillus cereus, Bacillus micoides. Аллохтонная флора – это микроорганизмы, попавшие извне при загрязнении водоемов, в том числе и патогенная.
Городские отходы и сточные воды Морской и речной флот Животноводческие и птицеводческие комплексы Человеческий фактор Старое машинное масло стало причиной загрязнения реки в Новосибирске. Фото: http://www.baltinfo.ru Методы дезинфекции животноводческих стоков и помета с ферм http://bizplan-uz.ru/industries/milk/17794/
Полисапробные зоны: сильное загрязнение, гниение; много органики, анаэробы, грибы, актиномицеты (до 1 млн /мл воды) Мезосапробные зоны: умеренное загрязнение, окисление; окисление азотсодержащих соединений; Nitrobacter, Nitrosomonas, Clostridium, Mycobacterium, Flavobacterium Олигосапробные зоны: окончание процессов самоочищения; высокая минерализация; до 1000 бактерий/мл воды
Протеолиты Аммонификаторы и нитрификаторы Аэромонады и бделловибрионы Споровые микроорганизмы Грибы и актиномицеты Целлюлозобактерии
Включает мелкие подвижные Гр(–) клетки. Типовой вид - В.bacteriovorus. Хемоорганотрофы, аэробы. Не сбраживают углеводы. Обладают протеолитической и оксидазной активностью. Оптимум роста около 30°С. Различают 2 стадии развития: Паразитическая стадия – клетки имеют вид изогнутых неподвижных палочек размерами 0,3 - 0,4x0,8 -2 мкм. Свободные формы полиморфны - монотрихиальные изогнутые палочки таких же или больших размеров. Паразитируют в периплазме E.coli, протея, вибрионов, псевдомонад, серраций и других Гр-) бактерий. Для паразитических видов характерен сложный и варьирующий цикл развития: а) обитание в абиогенной среде; б) прикрепление к клеточной стенке бактерий и проникновение в периплазму хозяина, сопровождающееся утратой жгутика; в) размножение в периплазме, протекающее по типу изоморфного деления, фрагментации длинной S-образной или спиралевидной структуры, или множественного деления с образованием сферопластов ; г) выход из бактерии типичных жгутиковых форм, сопровождающийся разрушением бактерии-хозяина. Прикрепление паразитической бактерии Bdellovibrio к клетке хозяина — Pseudomonas (по Штольлу, 1963).
Играют важное значение в очищении почвы и воды от бактерий - паразитов человека и животных. За секунду Bdellovibrio проплывает расстояние, равное 50 длинам своего тела. Если бы человек двигался с пропорциональной скоростью, быстрота его движения достигала бы 300 км/ч. Bdellovibrio составляют 0,02-0,04% от общего числа бактерий. В опытах Ю. Г. Талаевой и 3. С. Веркловой (1973) Bdellovibrio bacteriovorus уничтожали находящиеся в воде S. sonnei в течение 19-23 дней. Холерные вибрионы полностью лизировались Bdellovibrio в стерильной речной воде уже через 5-6 суток (Ф. X. Ибрагимов с соавт., 1976). Сами Bdellovibrio сохраняют жизнеспособность свыше 200 дней.
Изогнутые палочковидные, кокковидные или нитевидные аспорогенные монотрихиальные Гр(-) бактерии из семейства Vibrionaceae. Хемоорганотрофы, факультативные анаэробы. Растут при 20-30°С, рН 7,0, на простых питательных средах. Некоторые виды способны расти на минеральных средах с источником углерода в виде глюкозы и аргинина. Добавление в среды 7,5% натрия хлорида замедляет рост. Не чувствительны к тетрациклинам, аминогликозидам, полимиксину.
Обитают в пресноводных водоемах, сточных водах. Вызывают болезни рыб и лягушек. Выделены от больных с диареями, бактериемией, развивающимися на фоне резко сниженной резистентности. В 1969 г. предложено использовать их в качестве СПМО. Они в больших количествах содержатся в сточных водах и обладают большой энергией размножения. Служат показателем нагрузки сточных вод на водоем и имеют такое же значение, как ОМЧ. При большой концентрации аэромонад в воде может наступить пищевое отравление.
Среда Эндо Хромогенная среда для выявления бактерий семейства Enterobacteriaceae
Бактериофаги косвенно свидетельствуют о наличии в среде бактерий к которым они тропны
Общее микробное число – общее количество микроорганизмов в 1 мл воды ( не более 50 ) Коли-титр – наименьший объем воды в котором обнаруживается 1 кишечная палочка (не менее 300 мл), Коли-индекс – общее количество кишечной палочки в 1 литре воды ( не более 3 ). ОКФБ – 0/100 мл; колифаги – 0/1 мл; лямблии – 0/50мл
Контролируемые показатели Единица измерения Значение показателя Метод испытания Общие колиформные микроорганизмы ед /дм 3 не допускается ГОСТ 18963 E. coli и термотолерантные микроорганизмы ед /дм 3 не допускается ГОСТ 18963 ИСО 9308-1,2 1990 Колифаги КОЕ/дм 3 не допускаются МР 0119/1213 МУ 2285-81 Фекальные стрептококки ед/дм 3 не допускаются ИСО 7899-1,2; 1984 Энтеровирусы ед/10 дм 3 не допускаются МУ 2285-81 Сульфатредуцирующие клостридии ед/100 см 3 не допускаются ИСО 6461-1; 1989 ИСО 6461-2; 1986 Сальмонеллы ед/10 см 3 не допускаются МУ 2285-81 ИСО ПМС 6340 Патогенные микроорганизмы ( шигеллы, холерные вибрионы) ед /10 дм 3 не допускаются МУ 2285-81 Энтерококки ед/дм 3 не допускаются
Для определения микробного числа воздуха используют методы: Седиментационный – 2 чашки Петри оставляют на открытом воздухе в течение 60 мин. Культивируют: менее 250 колоний – чистый воздух, 250-500 – средняя степень загрязнения, более 500 – загрязненный. Аспирационный – более точный метод оценки с помощью аппарата Кротова.
S. aureus Споры плесневых грибов СПМО Legionella Аллергены Str. haemolyticus, Pseudomonas aeruginosa
Место отбора проб Микробное число S.aureus (в 250л) Операционная до начала работы Не более 500 Не допускается Операционная во время работы Не более 1000 Не допускается Родильная комната Не более 1000 Не допускается Палаты для недоношенных детей Не более 750 Не допускается
Санитарное состояние поверхности считается: отличным, если ОМЧ на 1см 2 не превышает 100, хорошим - при микробном числе от 100 до 1000, удовлетворительным - более 1000, плохим - более 10000.
Кишечная палочка, колиформные бактерии Энтерококк Золотистый стафилококк Протеи Клостридии Сальмонеллы Шигеллы Бруцеллы и т.д.
Отбор проб для санитарно-микробиологического исследования предметов обихода и оборудования проводится с помощью следующих методов: смывов (тампонами или салфетками); отпечатков (контактный метод); агаровой заливки.
Все санитарно-микробиологические исследования проводятся в соответствии с действующими нормативно-методическими документами : СанПиН – санитарными правилами и нормами ГОСТ – государственными отраслевыми стандартами МУ – методическими указаниями МУК – методическими указаниями по методам контроля
СанПиН 2.1.2.1188-03. Плавательные бассейны. Гигиенические требования к устройству, эксплуатации и качеству воды. Контроль качества. СанПиН 2.1.4.1074-01. Питьевая вода. Гигиенические требования к качеству централизованных систем питьевого водоснабжения. Контроль качества: санитарно-эпидемиологические правила и нормативы. СанПиН 2.1.4.1116-02. Питьевая вода. Гигиенические требования к качеству воды, расфасованной в емкости. Контроль качества. СанПиН 2.1.4.1175-02. Гигиенические требования к качеству воды нецентрализованного водоснабжения. СанПиН 2.1.5.980-00. Водоотведение населенных мест, санитарная охрана водных объектов. Гигиенические требования к охране поверхностных вод. МУ 2.1.4.1057-01. Организация внутреннего контроля качества санитарно-микробиологических исследований воды. МУК 4.2.2884-11. Методы микробиологического контроля объектов окружающей среды и пищевых продуктов с использованием петрифильмов. Соколов Д. М., Соколов М. С. Микробиологический контроль с использованием петрифильмов // Молочная промышленность. 2012. № 2. С. 36–37. МУК 4.2.1018-01. Санитарно - микробиологический анализ питьевой воды. Guidelines for drinking-water quality [electronic resource]: Recommendations. World Health Organization. 2006. Vol. 1. ГОСТ Р 52426-2005 (ISO 9308-1:2000). Вода питьевая. Обнаружение и количественный учет Escherichia coli и колиформных бактерий. Часть 1. Метод мембранной фильтрации. МР № 24 ФЦ 513. Определение колиформных бактерий и E. coli c использованием хромогенных и флюорогенных индикаторных сред производства Мerck (Германия). http://www.kemsma.ru/do/microbiology/lekcia.pdf
