УД Основы микробиологии и иммунологии Преподаватель: Прокофьева Наталия Сергеевна
Понятие и классификация микозов. Особенности формирования противогрибкового иммунитета. Противогрибковые препараты, и их механизм действия. Микробиологическая диагностика микозов. Профилактика микозов. Частная микология: -Кишечные грибковые инфекции ( микотоксикозы ) -Респираторные грибковые инфекции (глубокие или системные микозы) -Грибковые инфекции наружных покровов и слизистых (дерматомикозы) -Оппортунистические микозы
Микозы – это грибковые заболевания человека, вызванные патогенными и условно патогенными грибками. Микозы являются широко распространенной группой инфекционных болезней. Характер и тяжесть микозов зависят от вида гриба и локализации поражения. Развитию микозов способствуют любые заболевания, вызывающие снижение защитных сил организма. Могут поражаться любые ткани и органы человека, но чаще всего кожа, волосы, ногти.
Любой человек может заболеть грибковой инфекцией, но пожилые люди, а также больные с ослабленным иммунитетом, в связи с такими заболеваниями, как ВИЧ/СПИД или использующие иммуносупрессивные препараты, имеют более высокий риск развития микозов. Более широкое использование антибиотиков и иммунодепрессантов, таких как кортикостероиды, является основным фактором, способствующим высокой частоте грибковых инфекций. Антибиотики и иммунодепрессанты, нарушая нормальную бактериальную флору и подавляя иммунную систему, создают условия внутри организма, в которых грибы могут развиваться. Большую роль при этом играет нарушение обменных процессов, снижение баланса витаминов, нарушение биологического равновесия между макроорганизмом и резидентной микрофлорой, нарушение равновесия между разными группами микроорганизмов (развитие дисбактериоза). Состояние дисбактериоза обуславливает интенсивное размножение и распространение некоторых грибков биоценоза кишечника, слизистых оболочек, кожи и способствует переходу их из сапрофитного состояния в условно – патогенные и патогенные формы. И как следствие этого, эндогенно поражаются слизистые трахеи, бронхов, рта, легких, желудочно – кишечного тракта, мозговая ткань, пищевод, мочеполовые и другие органы.
1.Период внедрения гриба – чаще всего протекает бессимптомно. 2.Инкубационный период – длительность этого периода от нескольких дней до нескольких месяцев зависимости от возбудителя и грибкового поражения. 3.Период разгара заболевания Факторы патогенности грибов Адгезины – гликопротеины. Пенетрация и инвазия в подлежащие ткани связана с наличие гидролитических и кератолитических ферментов. Экзо- и эндотоксины. Первичные метаболиты – урказа, фосфолипаза – факторы агрессии. Вторичные метаболиты – экзогликан, меланин – факторы агрессии.
Кишечные грибковые инфекции Микотоксикозы Оппортунистические микозы Условно-патогенные грибы Кандида Аспергилл Криптококк Фузариум
Поверхностные микозы характеризуются, в основном, поражением волос и поверхностного рогового слоя эпидермиса. Заражение происходит вследствие прямого контакта с активным очагом инфекции. Поражения собственно кожи называются дерматомикозами, волос – трихомикозами, ногтей – онихомикозами у пациентов с серьезными иммунными проблемами или хроническими заболеваниями (например, сахарный диабет) микозы кожи и слизистых оболочек могут перейти в ткани, близлежащие к очагу инфекции.
Эпидемиология. Инфицирование происходит двумя путями. Прямой путь передачи инфекции возможен при контакте с почвой, растениями, больными животными или больным человеком, непрямой - при соприкосновении с различными вещами и предметами, бывшими в употреблении у больных, а также через предметы ухода за животными. Патогенез. Восприимчивость к грибковой инфекции обусловлена состоянием иммунной системы, нейроэндокринными и метаболическими нарушениями, состоянием кожи, сопутствующими заболеваниями. Возраст, пол, профессиональные факторы также имеют значение. Детская кожа с недостаточной плотностью и компактностью рогового слоя, эпидермиса и волос, измененным химизмом пота и водно-липидной мантии особенно благоприятна для внедрения патогенных грибов и для перехода сапрофитирую щей грибковой флоры в патогенную.
Культуральные свойства. Растет на среде Сабуро или картофельном агаре. Колонии мучнистые, зернистые с перистым краем, зеленовато коричневого цвета. Обратная сторона колоний желтая или желто-коричневая. Возбудитель Epidermophyton floccosum. Гриб имеет септированный, ветвящийся мицелий, крупные хламидоспоры и макроконидии, которые расположены группами на концах гиф в виде пучков бананов. Макроконидии тонкостенные, дубинкообразные с тупыми концами, септированные, попарно расположенные. Старая культура содержит хламидоспоры.
Эпидемиология. Источник инфекции больной. Заражение происходит при прямом и непрямом контакте через предметы, инфицированные грибом (одежда, обувь); в больницах – недостаточно продезинфицированные судна, термометры, белье; в спортзалах – маты и другой инвентарь. Микробиологическая диагностика Материал для исследования: чешуйки кожи из очагов поражения. 1.Микроскопия чешуек с целью обнаружения ветвящегося мицелия. 2.Культуральное исследование. Этиопатогенез. Одним из основных клинических проявлений являются эритематозные, шелушащиеся пятна (бляшки) в области паховых складок. Инфекционный очаг распространяется на внутреннюю поверхность бедра, низ живота и ягодицы. Выступившие на коже высыпания носят симметричный характер. По краям очагов имеется общий воспалительный валик, состоящий из пузырьков. Шелушение кожи умеренное.
Культуральные свойства. Колонии пушистые, плоские, бархатистые, реже мучнистые, белые, серые или кремовые. Обратная сторона желтого цвета. Растут быстро, уже на третьи сутки можно обнаружить колонии. Основной возбудитель грибы рода Microsporium Гриб имеет септированные гифы, бесцветные с булавовидными микроконидиями. Макроконидии веретеновидные, толстостенные. Верхняя куполовидная часть конидии имеет изогнутость.
Гриб инвазирует в роговой слой эпидермиса и прорастает. Благодаря кератинолитической и протеиназной активности он внедряется в слой эпидермиса. Далее базальной мембраны дерматофиты не проникают. Различают поверхностные формы микроспории (волосистая часть головы, гладкая кожа); глубокие, инфильтративно-нагноительные. На коже волосистой части появляются единичные слабовыраженные очаги диаметром до 5см. Они имеют правильную округлую форму и четкие границы. Находящиеся в очагах волосы тусклые, сероватые, обломанные на высоте 6мм. При использовании лампы Вуда под люминисцентным светом можно выявить свечение пораженных пушковых волос. Поверхность очага покрыта чешуйками, гиперемирована и немного инфильтрирована особенно в области волосяных фолликулов. По периферии очагов выявляются мелкие очаги микоза . Эпидемиология. Источник заражения – кошки, реже собаки. Инфекция передается от больного человека здоровому через зараженные предметы.
Культуральные свойства Колонии на среде Сабуро медленнорастущие, кожистые, бугристые, радиально-складчатые, фиолетовые. Возбудитель грибы рода Trichophyton мицелий в начале тонкий, ровный, септированный со временем становится широким, извилистым, ветвящимся с концевыми хламидоспорами. Макро и и микроконидий нет.
Поверхностная трихофития характеризуется появлением на волосистой части головы мелких очагов, имеющих четкие, ровные границы, округлой или овальной формы. Волосы обломаны на 2-4мм от уровня кожи. На коже очаги ограничены валиком, состоящим из пузырьков или корочек ярко-красного цвета. Они имеют тенденцию к слиянию. При слиянии образуются крупные очаги с неровным краем и небольшим шелушением. Пораженный волос
Кандидоз Развитию кандидоза способствуют неправильное назначение антибиотиков, обменные и гормональные нарушения, иммунодефициты, повышенная влажность кожи, повреждения кожи и слизистых оболочек. состоят из овальных почкующихся дрожжевых клеток (4-8 мкм), псевдогиф и септированных гиф. C. albicans образует хламидоспоры - толстостенные двухконтурные крупные овальные споры. На простых питательных средах при 25-27 С они образуют дрожжевые и псевдогифальные клетки. Колонии выпуклые, блестящие, сметанообразные, непрозрачные с различными оттенками. В тканях кандиды растут в виде дрожжей и псевдогиф.
Формы кандидоза При кандидозе рта на слизистых оболочках развивается острая псевдомембранозная форма болезни (так называемая молочница) с появлением белого творожистого налета, возможно развитие атрофии или гипертрофии, гиперкератоза сосочков языка. При кандидозе влагалища ( вульвовагинит ) появляются белые творожистые выделения, отек и эритема слизистых оболочек. Поражение кожи чаще развивается у новорожденных; на туловище и ягодицах наблюдаются мелкие узелки, папулы и пустулы. Возможны кандидная аллергия ЖКТ, аллергическое поражение органов зрения с развитием зуда век, блефароконъюнктивита. Эпидемиология. Кандиды являются частью нормальной микрофлоры млекопитающих и человека. Они обитают на растениях, плодах, являясь частью нормальной микрофлоры, они могут вторгаться в ткань (эндогенная инфекция) и вызывать кандидоз у паци - ентов с ослабленной иммунной защитой. Реже возбудитель передается детям при рождении, при кормлении грудью. При передаче половым путем возможно развитие урогенитального кандидоза.
Группа инфекций, вызванных грибами, которые живут в почве определенных географических областей возникают во время вдыхания спор с воздухом. Системные, глубокие, микозы характеризуются поражением внутренних органов с вовлечением в патологический процесс различных тканей Протекают как хронические бактериальные инфекции, вызванные микобактериями или актиномицетами. Первичные поражения обычно затрагивают легкие и протекают в форме острых пневмоний. Хронические формы встречаются реже. Они медленно прогрессируют и характеризуются образованием нагноительных ран или гранулематозных поражений; иногда возникают легочные каверны и патологический процесс распространяется на плевру. Возбудители глубоких микозов могут распространяться гематогенным путем по всему организму, образуя метастатические абсцессы или гранулемы в любых органах и тканях. Однако эти заболевания неконтагиозны, т.е. не передаются от человека к человеку или от животного к человеку.
Культуральные признаки Рост медленный – первые колонии появляются через три недели – небольшие, пушистые. При росте на кровяном агаре при 370С способен переходить в дрожжевую фазу. Возбудитель – диморфный гриб Histoplasma capsulatum Гриб диморфный, в мицелиальной фазе, представлен септированным мицелием Микроконидии сферической формы до 5-6 мкм; макроконидии до 20-25 мкм
Эпидемиология. Резервуар и источник – является почва. Путь передачи – аэрогенный. Восприимчивый коллектив – дети и взрослые, чаще иммунокомпроментированные. Микробиологическая диагностика Материал для исследования: гной, кровь, мокрота, костный мозг и биопсийная ткань. Методы исследования : 1. Обнаружение возбудителя в окрашенных препаратах. 2. Микологическое исследование. 3. Для серодиагностики гистоплазмоза разработаны РСК, ИФА, РИД. 4. Для обнаружения антигенов гистоплазм разработаны РИА и ИФА. Этиопатогенез. В месте входных ворот возбудителя образуется очаг гранулематозного воспаления. Гранулемы позже могут инкапсулироваться. При первичном инфицировании часто возбудитель проникает в кровь, что приводит к развитию фунгемии. Диссеминированные формы встречаются редко, чаще у больных с иммунодефицитами, у детей и ослабленных пожилых лиц. Острые тяжелые формы диссеминированного гистоплазмоза развиваются у больных ВИЧ-инфекцией, лейкозами. Распространение возбудителя с кровью по организму приводит к поражениям слизистых оболочек, ЦНС, надпочечников.
Бластомикоз –хронический микоз, вызывающий первичные поражения легких, а при гематогенном диссеминировании инфекции поражается кожа, подкожная клетчатка, кости и некоторые внутренние органы. Гриб диморфный. В тканях размножается в виде дрожжеподобных почкующихся клеток, а в культуре ткани в мицелиальной и дрожжевой фазах. Имеет округлые микроконидии овальной или грушевидной формы, хламидоспоры.
Эпидемиология. Резервуар – почва эндемичных районов. Источник инфекции – больной человек Путь передачи: воздушно-капельный. Восприимчивый коллектив: восприимчивость населения всеобщая; чаще болеют мужчины от 20 до 40 лет. Этиопатогенез. Гриб проникает в организм двумя путями – через кожу и через легкие. Инфекция начинается с образования безболезненной, слегка зудящей красной папулы. Со временем папула переходит в пустулу покрытую корками. Возникают очаги, пузыри. При надавливании на них выступают мелкие капли экссудата. В образовавшихся узлах можно обнаружить тканевые формы возбудителя. Клетки гриба можно обнаружить и в микроабсцессах. Заболевание протекает хронически. В случае генерализации процесса отмечаются вторичные очаги на наружных покровах.
Криптококкоз – подострый или хронический диссеминированный глубокий микоз, обычно наблюдаемый у лиц с выраженным иммунодефицитом, и характеризуется поражениями кожи, слизистых оболочек полости носа и рта, опорно-двигательного аппарата, ЦНС. Гриб диморфный, условно-патогенный дрожжеподобный. Форма клетки гриба круглая или овальная размером 5-10 мкм. Клетка снаружи покрыта капсулой, состоящей из нитей кислого полисахарида. Толщина капсулы иногда больше размеров самой клетки. При неблагоприятных условиях роста развиваются удлиненные и нитчатые формы гриба.
Эпидемиология. Резервуар– почва. Источник инфекции – больной человек Пути передачи: воздушно-капельный Восприимчивый коллектив: восприимчивость людей высокая. Среди заболевших чаще мужчины; группа риска: строители, проводящие ремонтные работы в старых зданиях; ВИЧ-инфицированные. Этиопатогенез. Криптококки формируют первичный очаг воспаления в легких с вовлечением в процесс регионарных лимфатических узлов. В пораженной ткани образуются гранулемы с некротическими казеозными изменениями. Инфекция длительное время может оставаться скрытой. Возбудитель способен существовать внутримакрофагально. Чаще всего процесс заканчивается спонтанным излечением, однако возможна генерализация, при которой возбудитель из первичного очага гематогенно или лимфогенно распространяется по организму, что приводит к возникновению внелегочных форм: криптококкозного менингита, поражению ЦНС, кожи, органов зрения, опорно-двигательного аппарата
Кокцидиоидоз - эндемичный системный микоз с преимущественным поражением дыхательных путей. Мицелий септирован, шириной 2-4 мкм, без микроконидий. По мере роста цитоплазма гриба концентри - руется, мицелиальная трубка в области септ запустевает, затем клеточная стенка мицелия разрывается и мицелий распадается на артроспоры шириной 1,5-2,3 мкм и длиной 1,5-15 мкм. Фрагментация наблюдается на 10-12-е сутки культивирования.
Культуральные свойства. Нетребователен к питательным средам. На среде Сабуро при комнатной температуре образует разнообразные колонии белого, серого или коричневого цвета. Иммунитет клеточный, основную роль играют Т-эффекторы, в том числе и Т-эффекторы ГЗТ, которые накапливаются на 2-3-й нед заболевания. Фагоцитоз незавершенный, фагоциты не способны защитить организм на стадии проникновения возбудителя. Антитела и комплемент не обеспечивают защиту организма против возбудителя. Наличие у больных антител при отрицательной ГЗТ на антигены гриба является плохим прогностическим признаком. Экологическая ниша - почва эндемичных зон. Эндемичные зоны находятся в Западном полушарии на территории США (западные и юго-западные штаты), а также Центральной (Мексика, Гватемала, Гондурас) и Южной (Венесуэла, Парагвай, Аргентина) Америки. Гриб преимущественно выявляется в зоне пустынь и полупустынь, иногда встречается в тропических зонах и прибрежных лесах (Северная Калифорния). Почва является естественной средой обитания гриба. Резервуар – почва Механизма передачи - аэрогенный Клиническая картина неспецифическая и определяется характером пораженных грибами органов. Для вторичного генерализованного кокцидиоидоза характерны хроническое течение - ремиссии сменяются обострениями в течение десятилетий; наличие фистулезных ходов, открывающихся на поверхности тела, нередко удаленных от очага гнойного воспаления; наличие сферул в патологическом материале
Группа инфекций, вызванных условно–патогенными грибами, которые развиваются на фоне тяжелого иммунодефицита Причина: Условно-патогенные грибы в норме не причиняют никакого вреда здоровому организму. Однако если у человека ослаблен иммунитет (например, ВИЧ–инфекция), такие грибы способны стать причиной тяжелой патологии. Оппортунистические глубокие микозы сопровождаются поражением внутренних органов и глубоких тканей. Например, инвазивный аспергиллез легких и системный кандидоз являются наиболее распространенными оппортунистическими грибковыми инфекциями
Морфология Аспергиллы представлены септированным ветвящимся мицелием. Конидии черного, зеленого, желтого или белого цвета. Конидии отходят от одного или двух рядов клеток - стеригм ( метул, фиалид ), находящихся на вздутии споронесущей гифы ( конидиеносца )
Эпидемиология. Аспергиллы находятся в почве, воде, воздухе и на гниющих растениях. Вызывают заболевания у человека с ослабленным иммунитетом. Аспергиллы передаются при ингаляции конидий, реже - контактным путем. Они могут попадать в легкие при работе с заплесневелыми бумагами, пылью (болезнь старьевщиков, мусорщиков). Инфицированию способствуют инвазивные методы лечения и обследования больных (пункция, бронхоскопия, катетеризация). Легочная форма У больных развиваются: инвазивный аспергиллез легких с быстрым ростом аспергилл и тромбозом сосудов, аллергический бронхолегочный аспергиллез в виде астмы Кишечная форма Токсины аспергилл, например афлатоксины, обусловливают афлатоксикозы - отравления пищевой этиологии, связанные с накоплением в продуктах питания афлатоксинов. Афлатоксины вызывают цирроз печени, оказывают канцерогенное действие.
Морфология. Пенициллы образуют мицелий из септированных ветвящихся гиф. На конце плодоносящей гифы ( конидиеносца ) образуются первичные и вторичные разветвления - метулы I и II порядка ( многомутовчатые кисточки). От вершин метул отходят пучки бутылкообразных фиалид, несущих цепочки округлых конидий зеленого, желто-коричневого, розового или фиолетового цвета.
Эпидемиология. Пенициллы широко распространены в почве, воздухе, в складах для овощей и фруктов, на гниющих растениях. Заражение происходит аэрогенным механизмом при вдыхании пыли, содержащей элементы гриба. Пенициллы вызывают пенициллиоз у пациентов с ослабленным иммунитетом Формы- легочная, схоже с аспергиллезом, и кишечная
Морфология Грибы рода Fusarium образуют хорошо развитый мицелий белого, розового или красного цвета. Имеются микроконидии, макроконидии, редко хламидоспоры. Макроконидии многоклеточные веретеновидно-серповидные. Микроконидии овальные грушевидные. Растут на среде Чапека в виде пушистых колоний.
. Грибы широко распространены, особенно на растениях. У лиц с иммунодефицитом грибы могут поражать кожу, ногти, роговицу и другие ткани Развиваются лихорадка, появляются высыпания. Очаги поражения локализуются в основном на конечностях. При пониженных температурах на злаках развивается психрофильный гриб F. sporotrichiella, продуцирующий микотоксин. Употребление в пищу таких злаков, перезимовавших под снегом, вызывает микотоксикоз Микотоксикозы вызываются также при употреблении изделий из зерна, пораженного F. graminearum : происходит отравление «пьяным хлебом» - поражение ЦНС с нарушением координации движений.
Большая часть из них сапрофиты, развиваются в почве и особенно в навозе травоядных животных. Некоторые мукоровные грибы продуцируют антибиотики ( рамицин ), органические кислоты или их используют для ферментативного производства продуктов питания из бобовых и злаков, а также для получения спирта из злаков. Вместе с тем, эти грибы часто вызывают порчу кормов и плодов, мукоромикозы внутренних органов человека и животных.
Несептированный широкий мицелий белого цвета, сидии, хламидоспоры. От мицелия отходят плодоносящие гифы ( спорангиеносцы ) со спорангием шаровидной формы, внутри которого находятся эндоспоры - спорангиеспоры.
Грибы имеют сложное антигенное строение. Антигены грибов делят на две группы : Первая группа – белковые антигены, сильные иммуногены. Они ответственны за развитие гуморального иммунного ответа. Вторая группа - полисахаридные антигены, обуславливают клеточный иммунный ответ и развитие гиперчувствительности замедленного типа.
Неспецифическая защита осуществляется через-факторы врожденного иммунитета 1.Кожный барьер (неповрежденный эпидермис, потовый и сальный секрет) 2.Фагоцитоз 3.Механический барьер слизистых оболочек 4.Естественные клетки киллеры 5.Системы комплемента Специфическая защита Осуществляется через факторы приобретенного иммунитета- 1.Гуморальные – гриб+ Антитело +комплемент =гибель гриба Из-за низкой иммуногенности грибов титры антител остаются низкими, поэтому основную защиту обеспечивают макрофаги, действующие по клеточному типу иммунной защиты. 2.Клеточные – гриб- Тх -Тэ-Макрофаг-иммунный фагоцитоз=гибель гриба При этом развивается ГЗТ (при кожных и глубоких микозах), и ГНТ –анафилаксия (при поражения слизистых оболочек дыхательных и мочеполовых путей ) Напряженность противогрибкового иммунитета оценивается по результатам кожно-аллергических проб с грибковыми аллергенами.
- лекарственные вещества, обладающие фунгицидным (уничтожение грибкового возбудителя) или фунгистатическим (подавление размножения грибкового возбудителя) действием и применяемые для профилактики и лечения микозов. Грибковые инфекции плохо поддаются лечению, что связано как с недостаточной эффективностью существующих препаратов, так и быстрой изменчивостью грибов, приводящей к появлению устойчивых форм. ! Лечение микоза должно быть назначено врачом после диагностики, самостоятельный подбор средств может оказаться неэффективным. Лечение необходимо доводить до конца, даже если негативные симптомы пропали.
По происхождению -природные – например, полиеновые антибиотики продуцируемые Streptomyces nodosum ( амфотерицин В), Actinomyces levoris Krass ( леворин ), Streptoverticillium mycoheptinicum ( микогептин ), Streptomyces noursei ( нистатин ), Streptomyces natalensis ( натамицин ). -синтетические- например, азолы
По химическому составу 1. Полиеновые антибиотики: тетраены ( натамицин ), гептаены ( нистатин, леворин, амфотерицин В, микогептин ). 2. Азолы 2а. Производные имидазола: 1 поколение ( клотримазол, миконазол, изоконазол, бифоназол, амиказол ); 2 поколение ( эконазол, тиоконазол, бутоконазол, фентиконазол ); 3 поколение ( кетоконазол, оксиконазол, сулконазол ) 2б. Производные триазола : итраконазол, флуконазол, вориконазол, терконазол, фторконазол. 3. Аллиламины (производные N- метилнафталина ): нафтифин, тербинафин, бутенафин. 4. Эхинокандины : каспофунгин, микафунгин, анидулафунгин. 5. Фторпиримидины : 5-фторцитозин. 6. Препараты других групп: гризеофульвин, аморолфин, циклопирокс, декамин, йодид калия, галапрогин, нитрофенол, толнафтат, толциклат, ундециленовая кислота, октицил, анилиновые красители, борная кислота, анмарин и др.
Механизм действия большинства противогрибковых средств связан с их воздействием на основные ферменты, влияющие на процесс биосинтеза эргостерола, входящего в состав мембраны клеток грибов, однако уровень воздействия различен: - Полиеновые антибиотики вызывают нарушение собственно эргостерола. - Азолы воздействуют на этапе перехода ланостерина в эргостерол и жирные кислоты, угнетая ферменты цитохрома Р-450, С-оксидазу и С14-диметилазу, что ведет к нарушению проницаемости клеточной стенки грибов, накоплению азольного препарата в клетке, изменению текучести мембран растущей клетки, усилению фагоцитоза и в итоге к прекращению роста клетки грибов. - Аллиламины отличает высокоспецифическое подавляющее действие на фермент скваленэпоксидазу, который катализирует один из этапов синтеза эргостерола клетками гриба, т.е. аллиламины угнетают синтез стеринов в грибной клетке на ранней стадии. - Эхинокандинов является ингибирование 1,3-β-D- глюкансинтазы, что приводит к нарушению образования 1,3-β-D- глюкана в клеточной стенке грибов, её дестабилизации и к утечке внутриклеточных компонентов, в результате чего наступает лизис клеток грибов. - Гризеофульвин и производные пиримидина, которые нарушают синтез РНК и ДНК в клетках грибов. - Циклопирокс, тормозящий трансмембранный обмен в клетках грибов.
Одной из серьезных проблем современности является появление устойчивых к лекарственным средствам микроорганизмов, в том числе возбудителей грибковых инфекций. В развитых странах мира на протяжении последних лет широко применяются фунгициды для защиты растений и обработки сельскохозяйственной продукции. При этом многие фунгициды имеют родственную молекулярную структуру с антифунгальными препаратами, которые с начала 21-го века все чаще используются в терапии грибковых заболеваний человека. Как следствие, происходит появление устойчивых форм грибков, не поддающихся лечению традиционными лекарственными противогрибковыми препаратами.
Микроскопия –быстрый и во многих случаях эффективный способ диагностики. При микроскопии принципиально важно дифференцировать дрожжевые и мицелиальные возбудители, а среди последних – микромицеты с септированным ( Aspergillus spp., гиалогифомицеты, феогифомицеты ) и несептированным (зигомицеты) мицелием. О снован на выявлении возбудителя в неокрашенных и окрашенных препаратах исследуемого клинического материала. Исследуют соскобы с кожи, ногтей, отделяемое покровных тканей, пунктаты абсцессов, отделяемое пазух носа, биологические жидкости (мокроту, бронхоальвеолярную жидкость, мочу, спинномозговую жидкость, желчь) и др.
Заключается в применении лампы Вуда в целях диагностики поверхностных кожных микозов. Люминесцентное обследование необходимо производить в затемненной комнате, очаги поражения должны быть предварительно очищены от корок, остатков мази и т. п. В ультрафиолетовых лучах лампы пораженные участки дают характерное флюоресцентное свечение – например, волосы, пораженные микроспорумами, особенно M. canis и M. audouinii, дают наиболее яркое свечение; волосы, пораженные трихофитоном, имеют тусклую зеленоватую флюоресценцию, при отрубевидном лишае - красновато-желтое или бурое свечение.(см. рисунок)
Цель - обнаружение специфических антител ( IgE, Ig М) Определение специфических антител IgG в сыворотке крови при диагностике хронического процесса. выявление секреторного IgA к антигенам грибов и микотоксинам в слюне. Для этого в сыворотке пробы проводят следующие серологические реакции: агглютинации, преципитации, связывания комплемента, иммунофлюоресценции с соответствующими антигенами. Имеет наибольшее значение при системных микозах, что связано с трудностью выделения тканевых форм возбудителя Например, - определение полисахаридного капсульного АГ у Cryptococcus spp в сыворотке крови; - диагностика инвазивных форм аспергиллеза по наличию галактоманнана в сыворотке крови; - выделение АГ маннана – компонента клеточной стенки грибов рода Candida.
выявляет некоторые компоненты клеточной стенки гриба в крови. Разработана только для диагностики кандидозов.
Цель – выявление аллергии, вызванной грибками Аллергены наносят на скарифицированную кожу по Пирке или втиранием в кожу по Моро, внутрикожно по Манту, а также уколом в кожу. С помощью этих проб выявляют аллергические реакции как немедленного, так и замедленного типа, что позволяет оценить состояние гуморального и клеточного иммунитета.
Наличие гиперемии и инфильтрата указывает на положительный результат реакции, т. е. на наличие инфекционной аллергии.
ПЦР-диагностика- позволяет обнаружить возбудителя по его ДНК. проводится при подозрении на глубокие и диссеминированные микозы Позволяет исследовать различные биологические жидкости
1 Этап Посев биологических материалов на питательную среду : -Кровь засевают в соотношении 1:3 или 1:10 в следующие среды: во флаконы для гемокультур, в бульон Сабуро (среда накопления) или в сердечно-мозговую двухфазную среду. -ликвора засевают на две чашки с агаром Сабуро по 0,1 мл, а остаток спинномозговой жидкости — в пробирки с жидкой средой Сабуро. -Мокроту, промывные воды бронхов, гайморовых полостей, мочу, сок простаты, желчь, дуоденальный сок, абдоминальную, синовиальную жидкости и др. после предварительной обработки засевают в количестве 0,1 мл на агар Сабуро -Небольшие фрагменты ткани растирают шпателем по поверхности агара Сабуро. Одновременно кусочки ткани помещают в жидкую среду Сабуро. 2 Этап Культивирование - инкубируют при 25-30"С и 37°С в течение от 4 до 7-10 дней, и более 3 Этап интерпретация результатов (см далее)
Интерпретация результатов Засеянные чашки начинают просматривать на второй день после посева с целью обнаружения начала роста возбудителей и дифференциации их от сапрофитов окружающей среды, которые могут контаминировать посевы. Идентификацию выделенных культур производят, прежде всего по морфологическим признакам колоний (по цвету, размеру, структуре, характеру поверхности, пигментации, наличию экссудата и пр.), по микроморфологии гриба (по наличию перегородок в мицелии, псевдомицелия, почкующихся клеток, артроспор, строению конидиеносцев, расположению и форме конидий и т.д.) и биохимическим особенностям (ферментативной и ассимиляционной активности ) 4 этап Определение чувствительности выделенных культур грибов к антимикотическим препаратам.
Общественная профилактика -Гигиеническое содержание мест общественного пользования: бань, саун, бассейнов, душевых, их регулярную уборку и дезинфекцию. - Дезинфекции с помощью 5% раствора хлорамина должны подвергаться полы, стены, инвентарь бань, душевых, ванных комнат, а также предметы обихода, особенно ванны, резиновые и деревянные решетки в них. -Профилактические медицинские осмотры обслуживающего персонала и лиц, часто посещающих бани и бассейн, входящих в группы риска (спортсмены, рабочие некоторых профессий, военнослужащие), обеспечивают снижение заболеваемости микозами стоп и онихомикозами. Личная профилактика микозов бывает первичной и вторичной. Первичная - соблюдать правила личной гигиены при регулярном посещении бассейна, бань, саун, а также избегать травматизации кожи и ногтей стоп. Обувь должна быть свободной и удобной. Избегать контакта с зараженными, бездомными собаками и кошками. Вторичная -включает в себя соблюдение гигиенического режима кожи стоп, длительного 2-3-месячного профилактического использования местных средств после системного лечения, дезинфекцию обуви, душевых, ванных комнат, повышение иммунитета.
