В 1963 году на рынок был представлен гематологический анализатор CC-1001 (счетчик частиц крови). С этого продукта начался длительный и успешный путь в развитии автоматизированных гематологических анализаторов стандартов высокого качества.
Для лаборатории Полная автоматизация всего процесса Высокая точность и надежность результатов Стандартизация процесса исследования Экономия средств и времени Высокая пропускная способность Автоматический встроенный контроль качества Биобезопасность Отсутствие «ошибок человеческого фактора» Для клиницистов Новые диагностические параметры позволяющие расширить понимание процессов, происходящих в крови в норме и при патологии Скорость и надежность результатов исследования
Кондуктометрический метод с гидродинамическим фокусированием: эритроциты, тромбоциты, гематокрит SLS-метод – бесцианидный метод (натрий лаурилсульфат): гемоглобин Метод амплитудной дискриминации (3 DIFF), основанный на определении размеров лейкоцитов Метод проточной цитофлюориметрии (5 DIFF), основанный на количественной оценке степени зрелости и метаболической активности клеток по содержанию нуклеиновых кислот Радиочастотный метод: клетки предшественники
I ПОКОЛЕНИЯ (простой CBC счетчик) II ПОКОЛЕНИЯ (анализатор 3 diff) III ПОКОЛЕНИЯ ( анализатор 5 diff) Г Е М А А Н Т А О Л Л И О З Г А И Т Ч О Е Р С Ы К И Е 9 ПОКАЗАТЕЛЕЙ 19 ПОКАЗАТЕЛЕЙ ДО 86 ПОКАЗАТЕЛЕЙ
Определяемые параметры WBC ( white blood cells ) RBC ( red blood cells ) HGB ( hemoglobin ) HCT ( hematocrit ) PLT ( platelets — кровяные пластинки) Эритроцитарные индексы MCV ( mean corpuscular volume ) MCH ( mean corpuscular hemoglobin ) МСНС ( mean corpuscular hemoglobin concentration ) RDW ( red cell distribution width ) Тромбоцитарные индексы MPV ( mean platelet volume ) PDW PCT ( platelet crit ) P-LCR 3 уровня дифференцировки лейкоцитов LYM % LYM MID % MID GRA % GRA
Гистограмм a распределения лейкоцитов по объему (WBC Histogram) гистограмм a распределения тромбоцитов по объему (PLT Histogram)
Оценивается По количеству эритроцитов (RBC) Концентрации гемоглобина (HGB) Гематокриту (HC T ) Эритроцитарным индексам (MСV, MCH, MCHC и RDW)
Схема миелопоэза
Возраст Женщины ( х 10 12 /л ) Мужчины ( х 10 12 /л ) 1-3 дня 4,0-7,6 4,0-7,6 1-12 лет 3,5-4,7 3,9-5 12-39 3,5-5 3,5-5 40-59 3,6-5,1 4,0-5,6 60-65 3,5-5,2 3,9-5,3 Старше 65 3,4-5,2 3,1-5,7 .
HGB (гемоглобин) – в норме м – 130…160 г/л; ж – 120…140 г/л. В крови человека имеется несколько типов гемоглобина: Н b A1 96-98% Hb A2 2-3% Hb F 1-2% У новорожденных преобладает Hb F - 60-80%
Увеличение (эритроцитоз) количества эритроцитов бывает при: новообразованиях; водянке почечных лоханок; влиянии кортикостероидов; болезни и синдроме Кушинга ; лечении стероидами. Небольшое относительное увеличение количества эритроцитов может быть связано со сгущением крови вследствие ожога, диареи, приема диуретиков. Уменьшение содержания эритроцитов в крови наблюдается при: кровопотере; анемии; беременности; гидремия ( внутривенное введение большого количества жидкости, т.е. инфузионная терапия) при оттоке тканевой жидкости в кровеносное русло при уменьшении отеков( терапия мочегонными препаратами). снижении интенсивности образования эритроцитов в костном мозге; ускоренном разрушении эритроцитов;
H С T = V эритроцитов V плазмы * 100 В норме H С T у мужчин = 40-48 % у женщин = 36-42 %
Эритроцитарные индексы МС V (mean corpuscular volume) средний объем эритроцита Норма 80-100 фл, характеризует эритроцит как нормоцит, ниже 80 фл оценивается как микроцитоз, выше 95 фл – как макроцитоз. Используется для характеристики типа анемии. Изменения MCV могут служить для определения нарушений водно-электролитного обмена. Повышение свидетельствует о гипотоническом нарушении, тогда как понижение значения MCV рассматривается о гипертоническом нарушении.
Повышение MCV (макроцитоз): Мегалобластная анемия (В12-, фолиеводефицитная); Макроцитоз (апластическая анемия, гипотиреоз, болезни печени, метастазы злокачественных опухолей); Курение и употребление алкоголя. Понижение MCV (микроцитоз): Гипохромные и микроцитарные анемии (анемия при дефиците железа, хронической патологии, талассемия); Гемоглобинопатии; Гипертиреоз (редко).
МСН (mean corpuscular hemoglobin) среднее содержание гемоглобина в отдельном эритроците измеряется в абсолютных единицах (норма 27 - 31 пг). МСН аналогичен цветовому показателю, но является более объективным параметром Изменения MCH лежат в основе разделения анемий на нормохромные (MCH – 27-31 пг), гипохромные (MCH менее 27 пг) гиперхромные (MCH более 31 пг)
Нормохромия характерна для здоровых людей, но может встречаться и при гемолитических и апластических анемиях, а также анемии, связанной с острой кровопотерей. Гипохромия обусловлена уменьшением объема эритроцитов (микроцитоз) или снижением уровня гемоглобина в эритроците нормального объема. Т.е. гипохромия может сочетаться как с уменьшением объема эритроцитов, так и наблюдаться при нормо- и макроцитозе. Гиперхромия не зависит от степени насыщения эритроцитов гемоглобином, а обусловлена только объемом красных кровяных клеток, т.к. повышение концентрации гемоглобина выше физиологического может закончиться кристаллизацией его и гемолизом эритроцита.
Нормохромия характерна для здоровых людей, но может встречаться и при гемолитических и апластических анемиях, а также анемии, связанной с острой кровопотерей. Гипохромия обусловлена уменьшением объема эритроцитов (микроцитоз) или снижением уровня гемоглобина в эритроците нормального объема. Т.е. гипохромия может сочетаться как с уменьшением объема эритроцитов, так и наблюдаться при нормо- и макроцитозе. Гиперхромия не зависит от степени насыщения эритроцитов гемоглобином, а обусловлена только объемом красных кровяных клеток, т.к. повышение концентрации гемоглобина выше физиологического может закончиться кристаллизацией его и гемолизом эритроцита.
Эритроцитарные индексы МСНС (mean corpuscular hemoglobin concentration) средняя концентрация гемоглобина в эритроците эта величина характеризует значение концентрации гемоглобина внутри эритроцита (норма 33 - 37 г/дл) Снижение МСНС наблюдается при заболеваниях, связанных с нарушением синтеза гемоглобина. Это самый стабильный, генетически детерминированный гематологический показатель. Повышение МСНС выше 38 г/дл встречается редко (врожденный сфероцитоз), холодовая агглютинация эритроцитов
Повышение МСНС фактически быть не может, т.к. повышение концентрации гемоглобина выше физиологического может закончиться кристаллизацией его и гемолизом эритроцита. Повышение МСНС свидетельствует об: Ошибках на аналитическом этапе при измерении данной пробы (погрешности определения гемоглобина или среднего объема эритроцитов); Ошибках на преаналитическом этапе (частичный гемолиз эритроцитов). Повышение МСНС выше 38 г/дл встречается редко (врожденный сфероцитоз), холодовая агглютинация эритроцитов Понижение МСНС: Железодефицитная анемия; Талассемия; Некоторые гемоглобинопатии. При В12- и фолиеводефицитной анемиях МСНС будет в норме, а гиперхромия в данном случае будет обусловлена увеличением объема эритроцитов.
RDW (red cell distribution width) показатель анизоцитоза эритроцитов норма 11.5 – 14.5% RDW характеризует колебания объема эритроцитов Высокое значение RDW означает гетерогенность популяции эритроцитов. Данный показатель следует анализировать вместе с гистограммой эритроцитов. RDW представляется важным дополнительным критерием для диагностики и динамического наблюдения за результатами лечения пациентов с анемиями.
RDW — Red cell Distribution Width — «ширина распределения эритроцитов» так называемый «анизоцитоз эритроцитов» — показатель гетерогенности эритроцитов, рассчитывается как коэффициент вариации среднего объема эритроцитов. RDW-SD — относительная ширина распределения эритроцитов по объёму, стандартное отклонение. RDW-CV — относительная ширина распределения эритроцитов по объёму, коэффициент вариации. ESR ( СОЭ ) (скорость оседания эритроцитов) — неспецифический индикатор патологического состояния организма.
Единицы измерения: % - процент отклонения объема эритроцитов от среднего значения в популяции (% разброса) fL – показывает разницу между максимальным и минимальным объемом эритроцита в популяции Референсные значения: 11,5 – 14,5% 35,0 – 56,0 fL
Кривая начинается и заканчивается на базисной линии Кривая имеет симметричную (куполообразную) форму Разделение на субпопуляции отсутствует
LD RBC PLT LD RBC Кривая распределения RBC стартует не на базовой линии. Возможные причины: Микроэритроциты Гигантские тромбоциты Агрегация тромбоцитов
UD RBC Кривая не заканчивается на базовой линии UD RBC Возможные причины: Холодовая агглютинация (проверить MCHC ≥ 40 g/dl, MCV>N, MCH>N)
Незначительное уширение эритроцитарной гистограммы. Повышение RDW
По мере нарушения гемоглобинообразования происходит снижение MCV, МСН, МСНС, увеличение RDW. Эритроцитарная гистограмма существенно уширяется и значительно сдвигается влево
Последним гематологическим показателем, который нормализуется при успешном лечении анемии, является RDW. Изменения гематологических показателей коррелируют с уровнем основных показателей обмена железа (содержанием сывороточного железа, ферритина, общей железосвязывающей способностью).
Дифференциальный диагноз анемий Микроцитарные- гипохромные Нормоцитарные- нормохромные Макроцитарные- гиперхромные Железодефицитная анемия Анемия хронических заболеваний ß- талассемия Миелодиспластический синдром (РА с кольцевидными сидеробластами) Анемия вследствие острой кровопотери Анемии хронических заболеваний Гемолитическая анемия Анемия вследствие ХПН Лейкозы B12 -дефицитная анемия Фолиеводефицитная анемия Гемолиз Заболевания печени Гипотиреоз Хронические обструктивные заболевания легких, МДС MCV < 80 фл MCH<27 пг MCV 80-100 фл MCH 27 -31 пг MCV >10 0 фл MCH>31 пг
RET % - относительное количество ретикулоцитов Норма - 0,67 – 1,92 % (мужчины) 0,59 – 2,07 % (женщины) RET # - абсолютное количество ретикулоцитов Норма - 30,4 – 93,5 х 10 9 /л (мужчины) 22,4 – 82,9 х 10 9 /л (женщины)
IRF (фракция незрелых ретикулоцитов) норма - 2-14% MRV ( средний объем ретикулоцитов), норма - 101,1 – 128,8 фл ; RET-He (содержание Hb в ретикулоцитах) –норма 28-36 пг
RTC, Ретикулоциты – это клетки крови, которые являются молодыми формами эритроцитов, соответственно являются (предшественниками зрелых эритроцитов). В норме 0,2-1,2% от общего количество эритроцитов : 30—70*10^9/л. Ретикулоциты обнаруживаются как в периферической крови, так и в костном мозге. Процесс созревания ретикулоцитов занимает от трех до пяти дней, после чего ретикулоциты становятся зрелыми эритроцитами. У новорожденных количество ретикулоцитов больше, нежели у взрослых
Повышение уровня ретикулоцитов : 1. Постгеморрагичекая анемия, увеличение в 3-6 раз). 2. Гемолитическая анемия (до 300%). 3. В-12 дефицитная анемия. 4. Гипоксия. 5. Талассемия. 6. Малярия. 7. Полицитемия. 8. Метастазирование опухолей в костный мозг. Понижение уровня ретикулоцитов : 1. Гипопластическая анемия. 2. Апластическая анемия. 3. В12-дефицитная анемия при отсутствии лечения. 4. Метастазы опухолей в кости. 5. Аутоиммунные заболевания системы кроветворения. 6. Микседема. 7. Заболевания почек.
Сохраняющийся ретикулоцитоз может свидетельствовать о продолжающемся кровотечении. Допинг контроль у спортсменов (прием ЭПО) Сниженное образование в костном мозге - ретикулоцитопения (апластическая анемия, ПККА, метастазы рака в КМ, лейкозы, снижение уровня ЭПО)
Фракция незрелых ретикулоцитов ( IRF )–ранний и чувствительный показатель ответа при лечении витамином В12, фолиевой кислотой, рЭПО Отсутствие увеличения IRF свидетельствует о недостаточной их дозе или резистентности к препарату
Фракция незрелых ретикулоцитов ( IRF )- показатель нормализации синтеза ЭПО после трансплантации почки Снижение RET - He свидетельствует о уменьшении концентрации гемоглобина в ретикулоцитах и необходимости назначения препаратов железа
LHD ( low hemoglobin density ),% - гемоглобин низкой плотности – новый параметр анализаторов Beckman-Coulter (LH750) Коррелирует с процентом гипохромных эритроцитов. При наличии более 10% гипохромных эритроцитов показатель LHD > 5,5%. Показатель LHD является индикатором железодефицитного состояния
