5 группа по Берджи – факультативно-анаэробные Грам- палочки Семейство : Enterobacteriaceae Род : Shigella Виды : Подгруппа А – Sh. dysenteriae ( 12 сероваров, 1-ый – Григорьева-Шига ) Подгруппа В – Sh. flexneri ( 6 сероваров, 6-ой - Ньюкастл ) Подгруппа C – Sh. boydii ( 18 сероваров ) Подгруппа D – Sh. sonnei ( нет сероваров, есть хемовары и фаготипы )
Мелкие палочки с закругленными концами Грамотрицательные Спор не образуют Неподвижны Не образуют капсулу (м.б. микрокапсула)
Хорошо растут на простых питательных средах Рост в бульоне в виде диффузного помутнения Селективные среды : Мюллера : МПБ Мел Раствор Люголя Гипосульфит Na Селенитовый бульон : МПБ Фосфат Na Селенисто-кислый Na Затем пересевают на дифференциально-диагностические среды : Эндо Левина Плоскирева (предпочтительнее) Колонии шигелл мелкие (1,0 – 1,5 мм), округлые, с ровным краем, блестящей поверхностью, прозрачные, бесцветные, т.к. шигеллы не расщепляют лактозу ( лактозонегативные ) (кроме Sh. sonnei ) (см. ниже)
Ферментируют глюкозу с образованием кислоты без газа, за исключением Sh. newcastle – до К и Г НЕ ферментируют лактозу, за исключением Sh. sonnei – ферментирует медленно (более 48 часов) НЕ образуют H 2 S НЕ разжижают желатин Могут образовывать индол
О-АГ : Родоспецифические Видоспецифические Группоспецифические Типоспецифические К-АГ
Эпидемиология шигеллёза Источник человек (антропоноз) больной или бактерионоситель Пути передачи : механизм – фекально-оральный ; пути : 1. алиментарный (пищевой) (для Sh. sonnei ) 2. контактно-бытовой (для Sh. dysenteriae ) 3. водный (для Sh. flexneri ) Восприимчивый коллектив – любой человек (после заболевания – стойкий типоспецифический иммунитет)
Факторы адгезии и колонизации пили белки наружной мембраны клеточной стенки муциназа Факторы инвазии и ферменты белки наружной мембраны – инвазины гиалуронидаза нейраминидаза Защита шигелл от фагоцитоза (агрессины) поверхностный К-антиген ЛПС Токсины 1. Эндотоксин ЛПС 2. Экзотоксины состоят из субъединиц А и В. Рецептором для токсинов служит гликолипид мембраны клетки. Энтеротоксин стимулирует активность аденилатциклазы и отвечает за развитие диареи. Токсин Шига ( нейротоксин ) и шигаподобные ( SLT-I и SLT-II ) оказывают прямое цитотоксическое действие.
Варианты заболевания: Проходят транзитом, не вызывая заболевания, при низкой инфицирующей дозе, воздействии нормальной микрофлоры и факторов местного иммунитета – транзиторное бактерионосительство Шигеллы (чаще Sh. s onnei ) размножаются в основном в тонком кишечнике – острый гастроэнтерит – шигеллез, протекающий по типу пищевой токсикоинфекции Поражение толстого кишечника, возникает колитический синдром, типичная острая дизентерия. Имеют место явления общей интоксикации, а если поражение вызвано шигеллой Григорьева – Шига – нейротоксикоз.
Проникновение шигелл per os Попадание в толстый кишечник (м.б. поражение тонкого кишечника) Адгезия к колоноцитам, колонизация, внедрение в колоноциты В колоноцитах размножаются, выделяют токсины Цитотоксины Гибель клеток, поражение нервного сплетения Выход ионов и воды в просвет кишечника Диарея (частота – до 50 раз в сутки) Активация аденилатциклазы Энтеротоксин Язвы в стенке кишки, кровь и слизь в кале, тенезмы, ложные позывы к дефекации
Исследуемый материал : испражнения Экспресс – метод РНТФ с индикаторными дизентерийными бактериофагами РИФ с люминесцирующей дизентерийной сывороткой Чувствительность этих реакций не очень высока, т.к. для их учета необходима большая концентрация шигелл в исследуемом материале: для РНТФ – 10 4 кл /г, для РИФ – 10 7 кл /г.
Микроскопический метод (низкая диагностическая ценность) окраска по Граму : грамотрицательные мелкие палочки
Бактериологический метод - основной Испражнения засевают на селективные среды : Мюллера : МПБ Мел Раствор Люголя Гипосульфит Na Селенитовый бульон : МПБ Фосфат Na Селенисто-кислый Na Затем пересевают на дифференциально-диагностические среды : Эндо Плоскирева (предпочтительнее) Характер роста шигелл : Колонии шигелл мелкие (1,0 – 1,5 мм), округлые, с ровным краем, блестящей поверхностью, прозрачные, бесцветные, т.к. шигеллы не расщепляют лактозу ( лактозонегативные )
Из лактозонегативных колоний : мазок, окраска по Граму определение подвижности Пересев на среду Ресселя для выделения чистой культуры Среда Ресселя : МПА 1% лактозы 0,1 % глюкозы Индикатор бромтимоловый синий Среда имеет столбиковую и скошенную часть При росте шигелл столбик желтеет, а скошенная часть остаётся первоначального травянисто-зелёного цвета
1. Незасеянная среда 2. Shigella 1 2
Идентификация чистой культуры : по биохимическим свойствам – посев на «пестрый» ряд - посев в МПБ для определения сероводорода и индола 2. по фаголизабельным свойствам – проба с видовыми индикаторными дизентерийными бактериофагами 3. по антигенным свойствам – реакция агглютинации на стекле : сначала со смесью видовых ( поливалентная сыворотка) а затем с каждой из моновалентных агглютинирующих адсорбированных видовых дизентерийных сывороток в эпидемиологических целях проводят определение серовара - реакция агглютинации на стекле с типовыми моновалентными агглютинирующими адсорбированными дизентерийными сыворотками.
Коммерческие микрообъемные тест-системы для биохимической идентификации энтеробактерий : содержат субстрат реакции и индикатор в питательной среде или в шаблоне-носителе (например, на бумажных дисках, которые вносят в лунки). Результаты биохимических тестов учитываются визуально, вид микроорганизма устанавливается с помощью таблицы идентификации, кодов (профилей) или компьютерных программ.
Серологический метод Может быть использован для выявления бактерионосителей. РПГА с эритроцитарными шигеллёзными диагностикумами РА с шигеллёзными диагностикумами
Вакцина Шигеллвак (вакцина дизентерийная против шигелл Зонне липополисахаридная жидкая). содержит очищенный ЛПС из культуры Sh. s onnei. Для профилактики дизентерии Зонне по эпид. показаниям у детей с 3-х летнего возраста и взрослых. Иммунитет сохраняется в течение 1 года. При необходимости ежегодная ревакцинация. Бактериофаг дизентерийный поливалентный жидкий, в таблетках с кислотоустойчивым покрытием и в свечах
Интести-бактериофаг жидкий – смесь стерильных фильтратов фаголизатов : Shigella flexneri, sonnei; Salmonella paratyphi A, paratyphi В, typhimurium, infantis, cholerasuis, oranienburg, enteritidis; Escherichia coli ; Proteus vulgaris, mirabilis; Enterococcus ; Staphylococcus ; Pseudomonas aeruginosa.
