Характеристика возбудителей, диагностика болезни Бруцеллез
содержание 1. Краткие сведения о болезни. 2. Историческая справка о болезни и возбудителях бруцеллеза. 3. Систематика бруцелл. 4. Характеристика возбудителя. 5. Устойчивость бруцелл во внешней среде. 6. Методы лабораторной диагностики бруцеллеза. 7. Иммунитет при бруцеллезе. 8. Профилактика и меры борьбы. Заключение 2
Литература 1. Вершилова П.А. и др. Патогенез и иммуно-логия бруцеллеза.- М.:Медицина.- 1974.- 270 с. 2. Григорьева Г.И. и др. Бруцеллы и бруцеллез. Микробиология, иммунология, биотехнология.- Н.Новгород.- НГСХА.- 1998.- 246 с. 3. Конопаткин А.А. и др. Эпизоотология и инфекционные болезни с.-х. животных.- М.: Колос, 1984.- 545 с. 4. Юсковец М.К., Тузова Р.В. Иммунологи-ческие реакции в диагностике бруцеллеза- Минск: Гос. Изд. БССР.- 1960.- 185 с. 3
-( brucellosis) высоко контагиозная хронически протекающая инфекционная болезнь человека и животных, вызываемая различными видами бруцелл, проявляющаяся абортами во второй половине беременности, задержанием последа, эндометритами, поражением опорно-двигательного аппарата, расстройством воспроизводительной способности. 4 Бруцеллез
Формы болезни : 1. Л атентная. 2. Генитальная. 3. Генерализованная. П ут и заражения : А лиментарный. 2. Аэрогенный. 3. Контактный: половым путем; через кожу; через слизистые. Течение болезни : Хроническое. 3 фазы развития болезни: первичная латенция; генерализация; вторичная латенция 5 Воспаление половых органов у собаки Бурсит запястного сустава у коровы
Некротические поражения плаценты плода при бруцеллезе 6
Слизистая матки больной бруцеллезом коровы
Геморрагическое воспаление плацента у больной бруцеллезом коровы
Геморрагическое воспаление плаценты у больной бруцеллезом овцы Бруцеллезные гранулемы в селезенке
Абортированный плод теленка при бруцеллезе
Алиментарный путь заражения человека бруцеллезом
10
Абортированный плод - основной источник заражения окружающей среды. Дикие животные и клещи - переносчики бруцелл 9
Исторические сведения IV век д.н.э. – Гиппократ описал клиническую картину бруцеллеза у людей. 1861 – Марстон Ф. описал болезнь у людей на о. Мальта. 1887 – Девид Брюс выделил возбудителя из селезенки человека, а Банг В. – от абортировавшей коровы. 1897 – Райт А. и Семпл Д. предложили РА для диагностики. 1904 – Заммит И. описал факторы передачи болезни. 1914 – Траум Р. выделил возбудителя от абортировав-шей свиноматки. 1918-1920 – разработана классификация возбудителей и в честь Бруса Д. болезнь названа бруцеллезом. Советские ученые Вышелесский С.Н., Юсковец М.К., Орлов Е.С., Вершилова П.А. и др. внесли значительный вклад в изучение бруцеллеза. 11
Стоят: Докт. Т. Заммит, капитан К. Кеннеди, майор Д. Веир Сидят: майор Д. МакНоут, докт. Д. Эйер, полковник Д. Брюс, майор МакКуллоч, штатн. хирург Е. Клейтон
Cистематика бруцелл Вид – 10 видов и 19 биотопов. Brucella melitensis - 3 биотипа (овцы, козы). Brucella аbortus - 9 биотипов (крупный рогатый скот). Brucella suis - 4 биотипа (типы 1, 2 и 3 - свиньи; тип 2 – зайцы; тип 4 - северные олени). Brucella canis - собаки. Brucella ovis – овцы. Brucella neotomae – кустарниковые крысы. Brucella ceti. Brucella pinnipedialis. Brucella microti. Brucella inopinata. 12 Царство: Бактерии, Тип: Протеобактерии, Класс: Альфа-протеобактерии, Порядок: Rhizobiales, Семейство: Brucellaceae, Род: Brucella Род Brucella – грамотрицательные, аэробные палочки и кокки с неясным систематическим положением. По морфологии бруцеллы сходны с бактериями родов Bordetella и Francisella.
13
Полиморфны, могут быть шаровидной, овальной и палочковидной формы. Размер 0,3-0,6 мкм для кокковых форм и 0,6-2,5 мкм для палочковидных форм. Неподвижны, спор и капсул не образуют, жгутиков не имеют. Строгие аэробы. Грамотрицательны, хорошо красятся анилиновыми красками. 14
МОРФОЛОГИЯ БРУЦЕЛЛ Окраска по Козловскому - бруцеллы красные, другие бактерии синие или зеленные 15
B.bovis В. melitensis 16
КУЛЬТУРАЛЬНЫЕ ОСОБЕННОСТИ БРУЦЕЛЛ S- помутнение, нежный осадок, прист.кольцо. Требовательны к питательным средам ПГГБ Картофельный агар Эрит-агар ПГГА МППГГБ МППБ МППГГА Сывороточно- декстрозный агар колонии рост на жидких средах R- прозрачный, крошковидный осадок. R- шероховатые, зернистые S- выпуклые, бесцветные, Æ 2 мм 18
Шероховатые колонии бруцелл ( R -формы) Гладкие колонии бруцелл S -формы 19
21
22
Изменчивость бруцелл C троение клеточной стенки L- форма S- ПСЦ НМ ПГС ЦПМ ЦПМ R- НМ ПГС ЦПМ 23 Диссоциация бруцелл S M R Формы
Причины изменчивости бруцелл АНТИБИОТИКИ, ПРОТИВОМИКРОБНЫЕ ПРЕПАРАТЫ L- R- 1 ПАРАЗИТИРОВАНИЕ В НЕТИПИЧНОМ ХОЗЯИНЕ R- 2 B.canis, B.ovis R- 24
Бруцеллы имеют глубинный О-антиген и поверхностный S -антиген, существующий в двух вариантах – А и М. Штаммы B.аbortus содержат больше А-антигена, а B.melitensis – М-антигена. Возбудитель из R -формы колоний утрачивает S -антиген. - S- антиген - О-антиген S - форма R - форма 25 Субъединичная вакцина на ос-нове О-антигена
Факторы вирулентности Биологический эффект 24 26
АДАПТАЦИОННЫЕ СПОСОБНОСТИ БРУЦЕЛЛ ВИРУЛЕНТНОСТЬ СО 2 СУБКУЛЬТУРЫ при пересевах на питательных сред ПЕРВИЧНЫЕ КУЛЬТУРЫ при выделении из патматериала ВЫСОКАЯ СЛАБАЯ - ( иск. B.ovis) + (10%) РОСТ 1-2 ДНЯ 5-10 ДНЕЙ 27
ФЕРМЕНТАТИВНЫЕ ОСОБЕННОСТИ БРУЦЕЛЛ Слабая биохимическая активность 28 Показатель Ферментативная способность Желатин - Каталаза + Сероводород ± Аммиак ±
Дифференциальная характеристика бруцелл
УСТОЙЧИВОСТЬ БРУЦЕЛЛ t кипячение - мгновенно 60 0 С - 30 мин В воде шерсть навоз почва 150 дней до 4-5 мес дез.вещества 0,5% формалин 0,01% KMnO 4 5% карболовый раствор 42 дня СЫР 4 мес брынза масло МЯСО до 40 дней говядина до 182 дней баранина 29
СХЕМА ДИАГНОСТИКИ БРУЦЕЛЛЕЗА 30
ОСНОВНЫЕ МАТЕРИАЛЫ ДЛЯ БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ 33 сыворотка крови молоко Внутренние органы Содержимое плода и его оболочек Сперма
61 1. ОТСУТСТВИЕ ГЕМОЛИЗА – (++++) 2. ГЕМОЛИЗ 25% ЭРИТРОЦИТОВ – (+++) 3. ГЕМОЛИЗ 50% ЭРИТРОЦИТОВ – (++) 4. ГЕМОЛИЗ 75% ЭРИТРОЦИТОВ – (+) 5. ГЕМОЛИЗ 100% ЭРИТРОЦИТОВ – (0) Реакция связывания комплемента (РСК)
Кольцевая реакция с молоком (КР) 35 + + + + -
Капельная реакция агглютинации (РА) с сывороткой крови а) отрицательный результат б) положительный результат 36
Розбенгалпроба (РБП) - +
Капельная реакция агглютинации (РА) с цельной кровью 37 а) отрицательный результат б) положительный результат
РАЗНОСЯТСЯ ПО ВСЕМУ ОРГАНИЗМУ РАЗРУШАЮТ ФАГОЦИТЫ ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ БРУЦЕЛЛ С ФАГОЦИТАМИ БРУЦЕЛЛЫ ФАГОСОМА ЛИЗОСОМА КАТАЛАЗА МАКРОФАГО- ТОКСИН H 2 O 2 «СКРЫВАЮТСЯ" ПОД МЕМБРАНОЙ ФАГОЦИТА РАЗМНОЖАЮТСЯ В ФАГОЦИТАХ 38
Мазки крови морской свинки, зараженной бруцеллезом 40
Мазок крови коровы, больной бруцеллезом. Слева – нейтрофил с единичными фагоцитированными бруцеллами, справа – множественный фагоцитоз бруцелл 42 39
Незавершенный фагоцитоз при бруцеллезе 43
Бруцеллы, захваченные фагоцитами 44
46 Вакцины для профилактики бруцеллеза крупного рогатого скота на основе штаммов: B.abortus 19, B.abortus 82, B.abortus 75/79 – АВ, адъювант вакцина из штамма B.abortus КВ 17/100. Вакцины для профилактики бруцеллеза мелкого рогатого скота на основе штаммов: B.abortus 19, B.melitensis Rev-1. Специфическая профилактика бруцеллеза
47 Лечение людей, больных бруцеллезом 1. Рифампин (рифампицин) по 600-900 мг/сут. внутрь и вибрамицин (доксициклин) по 200 мг/сут. не менее 6 недель (или несколько месяцев при осложнённом течении заболевания). При рецидиве лечение повторяют. 2. Доксициклина гидрохлорид по 100 мг внутрь 2 р/сут. (или тетрациклин по 500 мг внутрь 4 р/сут.) в течение 3-6 нед и стрептомицина сульфат по 1 г в/м 1-2 р/сут. в течение 2 нед. 3. Триметоприм-сульфаметоксазол (ко-тримоксазол) и рифампицин по 15 мг/кг внутрь в 2-3 приёма. 4. Офлаксацин по 200-300 мг 2 р/сут и рифампицин. 5. Глюкокортикоиды, например преднизолон по 20 мг внутрь 3 р/сут в течение 5-7 дней, назначают одновременно с антибиотиками при тяжёлом течении заболевания.
Семинар по диагностике бруцеллеза (Батон-Руж, Луизиана)
48 Заключение Одним из важнейших условий подъёма животноводства и обеспечения населения России качественными продуктами питания является ликвидация инфекционных болезней. Одна из болезней, наносящих значительный ущерб экономике страны – бруцеллёз, который обладает высокой контагиозностью, хроническим течением, быстрым распространением, обуславливает поражение различных органов, систем организма и нарушает воспроизводительную функцию у человека и животных. Поэтому своевременная диагностика бруцеллеза и ликвидация источника инфекция - первостепенная задача ветеринарных специалистов.
